福建改進(jìn)雷公藤內(nèi)酯甲含量測定方法

福建省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究所日前采用高效液相色譜法（HPLC）測定雷公藤多苷片中內(nèi)酯甲的含量，并認(rèn)為HPLC法與薄層掃描法（TLCS）相比，更準(zhǔn)確，也更可靠。

雷公藤多苷片是由衛(wèi)矛科植物雷公藤Triptery-giumwilfordilHook1f精制得到的雷公藤多苷經(jīng)壓制成的片劑，用于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、紅斑狼瘡的治療。

研究人員采用HPLC法測定，其色譜條件是色譜柱:HypersilBDS(250毫米×4.0毫米，5微米)；流動(dòng)相:甲醇-乙腈-水(65∶15∶20)；流速:1毫升/分鐘；檢測波長:210納米；進(jìn)樣量:20微升；柱溫:室溫。TLCS掃描條件為展開劑：氯仿-甲醇(85∶1)；顯色劑：磷鉬酸(5%的乙醇溶液)；波長λs=640納米，λr=370納米，狹縫1.2毫米×1.2毫米，反射成鋸齒形掃描。

研究人員發(fā)現(xiàn)，不同批號(hào)的雷公藤多苷片采用TLCS測定其內(nèi)酯甲含量時(shí)，除批號(hào)為010115外，其余結(jié)果均比HPLC法高。研究人員認(rèn)為，因?yàn)榕c內(nèi)酯甲顯相同顏色的斑點(diǎn)距離太近，在TLCS法中，峰面積切割時(shí)會(huì)把距離太近的斑點(diǎn)面積也帶入結(jié)果，導(dǎo)致測定結(jié)果比HPLC法的高。此外，研究人員采用TLCS法測定雷公藤內(nèi)酯甲的含量時(shí)，重現(xiàn)性差、準(zhǔn)確度不高。研究人員認(rèn)為影響TLCS法測定的因素有其他成分分離出來的斑點(diǎn)、薄層板的厚度、顯色劑的濃度、顯色劑噴灑的量、加熱的時(shí)間、放置的時(shí)間等，故干擾性大，結(jié)果不夠準(zhǔn)確。研究人員指出，用HPLC法測定雷公藤內(nèi)酯甲的含量，能將其與其它成分較好地分離開來，測定結(jié)果比TLCS法更準(zhǔn)確，更可靠。但要注意HPLC法測定雷公藤內(nèi)酯甲的含量時(shí)，樣品需經(jīng)過中性氧化鋁柱層析精制，否則分離效能差，雷公藤內(nèi)酯甲的峰與雜質(zhì)峰部分重疊。

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