乙肝基因治療研究獲進(jìn)展

由山東省立醫(yī)院科研中心王延軍博士和孫斌主治醫(yī)師承擔(dān)的一項(xiàng)山東省衛(wèi)生廳計(jì)劃課題——“B7-2對(duì)HBV基因疫苗誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞免疫應(yīng)答的影響”，近日通過(guò)了山東省衛(wèi)生廳主持的科技成果鑒定。

慢性乙型肝炎是嚴(yán)重影響我國(guó)人民健康的常見(jiàn)病和多發(fā)病，目前乙肝病毒（HBV）表面抗原在一般人群中攜帶率高達(dá)9.09%，但至今對(duì)其仍無(wú)滿意的治療方法，尤其對(duì)處于免疫耐受狀態(tài)的慢性HBV攜帶者，更是臨床的治療難題。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外專家針對(duì)該病毒的致病機(jī)制，對(duì)如何打破乙肝病毒的免疫耐受做了大量的研究工作，現(xiàn)已成為當(dāng)前專家們關(guān)注的熱點(diǎn)?；蛞呙纾ㄓ直环Q為DNA疫苗）作為新的生物治療技術(shù)，可在誘導(dǎo)體液、細(xì)胞免疫應(yīng)答方面發(fā)揮重要作用，更由于它比傳統(tǒng)蛋白質(zhì)疫苗誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，且具有一定的安全性，因此在抗感染、抗腫瘤等免疫研究中備受關(guān)注。

在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，王延軍博士的這項(xiàng)研究利用基因轉(zhuǎn)導(dǎo)技術(shù)，將基因工程構(gòu)建的基因疫苗免疫小鼠，證實(shí)了B7-2真核表達(dá)質(zhì)粒為佐劑與目的疫苗共免疫，兩者結(jié)合可有效增強(qiáng)其特異性免疫應(yīng)答。這種共免疫策略為增強(qiáng)抗HBV特異性細(xì)胞免疫應(yīng)答的抗HBV治療新途徑提供了有意義的理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。上述研究結(jié)果為臨床醫(yī)生提供了一個(gè)全新的具有廣闊的臨床研究與應(yīng)用前景的抗HBV治療新理念及方法。

在臨床試驗(yàn)中，王延軍博士等首先采用免疫熒光技術(shù)，分別對(duì)50例慢性活動(dòng)性肝炎患者和50例肝癌患者組織切片中B7-2分子的表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè)，觀察到前者B7-2表達(dá)顯著高于后者，揭示了其在增強(qiáng)T細(xì)胞特異性免疫應(yīng)答中的重要作用。然后采用基因轉(zhuǎn)染技術(shù)，將B7-2表達(dá)質(zhì)粒pcB7-2轉(zhuǎn)染至人肝癌HMC7721細(xì)胞中，流式細(xì)胞儀檢測(cè)證明了B7-2分子可在真核細(xì)胞中表達(dá)。在此基礎(chǔ)上，將B7-2（pcB7-2）和HBV(pcSS2)DNA疫苗，先后共免疫小鼠，觀察到pcB7-2增強(qiáng)了HBV遲發(fā)性超敏反應(yīng)(DTH)和抗HBV的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTL）活性。證明HBVDNA疫苗能夠誘導(dǎo)一定水平的DTH應(yīng)答和CTL活性，當(dāng)HBVDNA疫苗與B7-2表達(dá)質(zhì)粒共免疫時(shí)，特異性細(xì)胞免疫應(yīng)答則顯著增強(qiáng)，表明共免疫的B7-2表達(dá)質(zhì)粒激活了CTL的裂解活性。這樣為逆轉(zhuǎn)慢性乙肝患者的免疫耐受，增強(qiáng)免疫系統(tǒng)對(duì)乙肝病毒的免疫識(shí)別和效應(yīng)功能，徹底治愈乙型肝炎提供了良好的前景。

鑒定專家組認(rèn)為，該課題所得成果為抗HBV的基因疫苗聯(lián)合免疫治療提供了新思路，具有良好的應(yīng)用價(jià)值。

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