中藥品質(zhì)鑒定的新方法--生物鑒定法

中藥品質(zhì)鑒定的新方法--生物鑒定法

中藥生物鑒定法是近年來興起的中藥品質(zhì)鑒定新方法，它和傳統(tǒng)的基原鑒定法、性狀鑒定法、顯微鑒定法、理化鑒定法一起，并稱為中藥的五大鑒定法。

生物鑒定法具有先進(jìn)性、適用性、可操作性和專屬性強(qiáng)等特征，并且能夠突出中藥的藥效學(xué)作用，準(zhǔn)確性高。中藥生物鑒定法為中藥質(zhì)量現(xiàn)代化和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范化的研究提供了新思路。但此方法尚處于起步階段，在具體實(shí)施中相關(guān)方法和技術(shù)還有待于進(jìn)一步完善。

具體來說，生物鑒定法就是利用藥效學(xué)和分子生物學(xué)等有關(guān)技術(shù)來鑒定中藥品質(zhì)的一種方法，通常生物效應(yīng)鑒定法和基因鑒定法兩大類。按照鑒定的目的和對(duì)象不同，也可分為免疫鑒定法、細(xì)胞生物學(xué)鑒定法、生物效價(jià)測(cè)定法、純指標(biāo)測(cè)定法、DNA遺傳標(biāo)記鑒定法、mRNA差異顯示鑒定法等。免疫鑒定法是利用中藥含有的特異蛋白為抗原制備的特異抗體，與供試品種特異抗原結(jié)合產(chǎn)生沉淀反應(yīng)的一種方法，此法可準(zhǔn)確地鑒別中藥品種。細(xì)胞生物學(xué)鑒定法主要采用染色體的分類技術(shù)對(duì)中藥進(jìn)行鑒別。

中藥某特定種群的生物體細(xì)胞中染色體的形態(tài)、組型是穩(wěn)定不變的，代表該種群的基本遺傳特征，根據(jù)該特征即可鑒定中藥的品種，適用于果實(shí)和種子類中藥的鑒定。

生物效價(jià)測(cè)定法重點(diǎn)在于測(cè)定藥物對(duì)生物機(jī)體某方面作用的強(qiáng)度，如對(duì)洋地黃強(qiáng)心指標(biāo)的生物效價(jià)的測(cè)定等。

此法常采用動(dòng)物試驗(yàn)方法，如鴿法、豚鼠法等。純指標(biāo)測(cè)定法就是測(cè)定某藥物或某類藥物某一特性或某一藥理作用的強(qiáng)弱，如使用溶血法鑒定柴胡和大葉柴胡。

DNA遺傳標(biāo)記鑒定法主要運(yùn)用分子遺傳學(xué)技術(shù)，如對(duì)雞內(nèi)金與鴨內(nèi)金的鑒別，可利用微量DNA提取技術(shù)，從測(cè)試藥材中提取DNA，進(jìn)行DNA堿基序列測(cè)定，最后鑒別出真?zhèn)?。mRNA差異顯示鑒定法是利用中藥不同組織或細(xì)胞在基因表達(dá)上的差異進(jìn)行鑒定的一種方法。主要通過將總RNA反轉(zhuǎn)錄成單鏈cRNA，然后進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)，分離出不同分子大小的DNA，挑選出有差異的表達(dá)基因進(jìn)行序列分析。采用該技術(shù)可提煉出栽培和野生、道地與普通藥材之間的特征，可望廣泛用于中藥品種鑒定。中藥生物鑒定法側(cè)重中藥的品質(zhì)和臨床用藥的安全性、有效性等的有機(jī)結(jié)合的研究，可以配合其他鑒定方法綜合解決中藥品質(zhì)鑒定的難題，并嘗試為中醫(yī)與中藥現(xiàn)代化的結(jié)合找到突破口。

筆者認(rèn)為，中藥的品種鑒定和質(zhì)量控制是中醫(yī)藥研究的基礎(chǔ)，選擇最佳的方法、手段鑒定和評(píng)價(jià)中藥是新藥開發(fā)的重要環(huán)節(jié)。但由于經(jīng)濟(jì)實(shí)力和技術(shù)手段等多方面原因，使中藥鑒定目前面臨許多問題，如中藥樣品庫和數(shù)據(jù)信息庫的建立，中藥鑒定的體系和模式的確定，以及研究體系的問題等。

當(dāng)務(wù)之急要講清楚專屬性的鑒別特征和客觀的質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)與方法兩個(gè)問題。要解決這些問題，主要應(yīng)從形態(tài)學(xué)方法、化學(xué)和藥效學(xué)方法、現(xiàn)代細(xì)胞與分子生物學(xué)方法三方面進(jìn)行研究。在中成藥方面，為了使中藥國際化和標(biāo)準(zhǔn)化，許多醫(yī)藥科研工作者已經(jīng)對(duì)中成藥做了多方面的研究，但數(shù)研究單方面地集中在經(jīng)方的藥效學(xué)方面，少數(shù)集中在作用機(jī)理、方劑組成、配伍加減、單味藥的功效成分、有效部位群等方面的研究。對(duì)中藥復(fù)方的質(zhì)量綜合評(píng)價(jià)，尤其是利用中藥鑒定關(guān)鍵技術(shù)對(duì)中藥的鑒定特征的提煉和整合工作研究甚少。

人們把著眼點(diǎn)多放在了某一點(diǎn)的高新技術(shù)開發(fā)上，忽略了中藥研究的整體觀和研究方法的相關(guān)性。尤其在質(zhì)量評(píng)價(jià)方面忽略了中藥材及其復(fù)方鑒定特征的相關(guān)性。筆者認(rèn)為，我們可選擇中藥復(fù)方或中成藥為載體，運(yùn)用DNA遺傳標(biāo)記鑒定方法，通過對(duì)各藥遺傳標(biāo)記特征的提煉、整合研究，確立其專屬性的評(píng)價(jià)指標(biāo)和數(shù)據(jù)庫，構(gòu)建其綜合評(píng)價(jià)的模式，并嘗試為進(jìn)一步控制中成藥的質(zhì)量提供科學(xué)的方法和適用技術(shù)。

?淺談中藥材種子質(zhì)量鑒別方法

隨著春播的開始，中藥材種子市場(chǎng)也相繼紅火起來，但許多農(nóng)民朋友在購買中藥材種子時(shí)，由于缺乏相關(guān)的專業(yè)知識(shí)，不能把握種子的質(zhì)量，時(shí)常被一些種子騙子所蒙騙，造成不必要的經(jīng)濟(jì)損失。其實(shí)藥材種子都有其不同的自身屬性及理化特征，主要鑒別方法有兩個(gè)方面，即官能鑒定法和理化鑒定法。理化鑒定法操作的專業(yè)性較強(qiáng)，難度較大，下面專門介紹官能鑒定法：
所謂官能鑒定法：就是指用人的感覺器官如用眼觀察、口嚼、手摸、鼻聞等直觀反應(yīng)來判斷中藥材種子的優(yōu)劣。這種方法也是人們?cè)陂L(zhǎng)期的生產(chǎn)實(shí)踐中總結(jié)出的寶貴經(jīng)驗(yàn)，具有很高的實(shí)用價(jià)值。主要包括以下幾個(gè)方面：
一、 觀察法： 因?yàn)楦鞣N藥材種子都有其固有的色澤，根據(jù)色澤的變化可以在某種程度上可區(qū)別種子的真假、成熟度及新陳程度。如黃芪種子，其本身的顏色是黃棕色，新種子其顏色發(fā)亮具有較強(qiáng)的感光反應(yīng)，而且剖開基斷面顏色淺黃色且鮮亮，子葉飽滿，用手指甲壓擠子葉能看出明顯的油份。但隔年種子基本無上述情況。
二、 口嚼法： 有些藥材新種子，去掉種皮后，放入口中用齒嚼，味香且感覺脆，而陳種子味淡且澀，油辣嗓子，嚼時(shí)感覺軟，沒有脆硬度。
三、 手摸： 用手摸時(shí)有不同的感覺，例如桔梗。將手伸入桔梗新種子堆里，手有一種涼爽、滑的感覺，而陳種子則有種澀的感覺，且插入堆里的深度不如新種子。
四、 鼻聞： 利用新陳種子氣味的差異，可以判斷種子的質(zhì)量，如柴胡，新種子經(jīng)手搓之后，有一種清香的氣味，而陳種子則沒有。其他品種新種子有其固有味道，陳種子味道淡些。

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