梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查方法

以往的實(shí)驗(yàn)室檢查有梅毒螺旋體檢查，梅毒血清試驗(yàn)和腦脊液檢查。隨著基因診斷技術(shù)的發(fā)展，PCR技術(shù)應(yīng)用檢測梅毒螺旋體DNA，使梅毒的診斷變得準(zhǔn)確、快速、敏感。

一、梅毒螺旋體檢查

（一） 檢查方法

1．暗視野顯微鏡檢查：在皮損處，用玻片刮取組織滲出液或淋巴結(jié)穿刺液，見有活動的梅毒螺旋體。

2．免疫熒光染色：在熒光顯微鏡下可見綠色的梅毒螺旋體。

3．活體組織檢查梅毒螺旋體，如用銀染色法（Warthin-starry）法或（Levoaditis法)或熒光抗體染色，可查見梅毒螺旋體，呈黑褐色，有螺旋結(jié)構(gòu)，位于真皮毛細(xì)血管周圍。銀染色的陽性結(jié)果需謹(jǐn)慎解釋，因?yàn)轭愃泼范韭菪w的其他物質(zhì)易混淆。而特異性熒光檢查則更為可靠。

（二） 螺旋體的鑒別

鏡下檢查梅毒螺旋體與雅司、地方性梅毒、品他三種非性病性螺旋體鑒別，此外還應(yīng)與齒大螺旋體、齒小螺旋體、軟螺旋體、生殖器螺旋體相鑒別。

1．雅司、地方性梅毒、品他三種非性病螺旋體：形態(tài)上不能與梅毒螺旋體相區(qū)別，但流行病學(xué)、病史、臨床表現(xiàn)可以鑒別；

2．齒大螺旋體：為疏螺旋體，比梅毒螺旋體長，存在于口腔中，尤其在齒縫內(nèi)最多；

3．齒小螺旋體：比梅毒螺旋體短，旋距也短，運(yùn)動不規(guī)則，兩端較中部略寬。主要見于齒垢中；

4．軟螺旋體：為疏螺旋體，螺旋較少，運(yùn)動不規(guī)律且快，常不斷改變其形態(tài)。寄生于皮膚潰瘍中。

5．生殖器螺旋體：比梅毒螺旋體短小，螺旋體大而不規(guī)則，生于陰垢內(nèi)，不經(jīng)常清洗者檢出率較高。

6．其他：與螺旋形網(wǎng)狀纖維、纖維蛋白細(xì)絲、纖毛、串狀紅細(xì)胞等呈螺旋狀的物體相鑒別。

二、梅毒血清試驗(yàn)

根據(jù)所用抗原不同，梅毒血清試驗(yàn)分為以下兩大類：

（一） 非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)，用心磷脂作抗原，測定血清中抗心磷脂抗體，亦稱反應(yīng)素。本試驗(yàn)敏感性高而特異性較低，且易發(fā)生生物學(xué)假陽性。早期梅毒患者經(jīng)充分治療后，反應(yīng)素可以消失，早期未經(jīng)治療者到晚期，部分病人中反應(yīng)素也可以減少或消失。目前一般作為篩選和定量試驗(yàn)，觀察療效，復(fù)發(fā)及再感染。

1．性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)（Venereal Disease Research Laboratory test，VDRL）；用心磷脂、卵磷脂及膽固醇為抗原，可作定量及定性試驗(yàn)，試劑及對照血清已標(biāo)準(zhǔn)化，費(fèi)用低。此法常用，操作簡單，需用顯微鏡讀取結(jié)果，缺點(diǎn)是一期梅毒敏感性不高。

2．快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn)（Rapid Plasma reagin test， RPR）：是VDRL抗原的改良，敏感性及特異性與VDRL相似，優(yōu)點(diǎn)是肉眼即可讀出結(jié)果。

3．不加熱血清反應(yīng)素玻片試驗(yàn)（Unheated Serum Reagin USR）也是VDRL抗原的改良，敏感性及特異性與VDRL相似。

（二） 梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)：用活的或死的梅毒螺旋體或其成分來作抗原測定抗螺旋體抗體。這種試驗(yàn)敏感性和特異性均高，一般用作證實(shí)試驗(yàn)。這種試驗(yàn)是檢測血清中抗梅毒螺旋體IgG抗體，即使患者經(jīng)過足夠治療，仍能長期存在，甚至終身不消失，血清反應(yīng)仍持續(xù)存在陽性，因此，不能用于觀察療效。

1．熒光梅毒螺旋抗體吸收試驗(yàn)（FTA-ABS Test）：此法是較敏感和較特異的螺旋體試驗(yàn)。

2．梅毒螺旋體血凝試驗(yàn)（TPHA）：敏感性和特異性均高，操作簡便，但對一期梅毒不如FTA-ABS試驗(yàn)敏感。

3．梅毒螺旋體制動試驗(yàn)（Treponema Pallidum immobilization ，TPI）；用Nichol株螺旋體（活的）加病人血清（含抗體）后，在補(bǔ)體的參與下可抑制螺旋體的活動。如≥50%梅毒螺旋體停止活動，則為陽性。此試驗(yàn)特異性、敏感性均高，但設(shè)備要求高，操作難，僅供研究用。

三、基因診斷技術(shù)檢測梅毒螺旋體

梅毒螺旋體不能進(jìn)行體外培養(yǎng)。檢測臨床標(biāo)本中梅毒螺旋體最敏感、可靠的方法是兔感染試驗(yàn)（RIT），RIT能證實(shí)活的梅毒螺旋體存在，是檢測梅毒螺旋體常用的標(biāo)準(zhǔn)方法。然而用RIT對新生兒或成人梅毒進(jìn)行常規(guī)診斷不切合實(shí)際。梅毒的血清學(xué)診斷對確定感染及治療很有意義，但對早期梅毒診斷不敏感，對先天性及神經(jīng)性梅毒的診斷不夠特異。血清學(xué)試驗(yàn)用作先天性梅毒的輔助診斷，其首要問題是將無癥狀感染嬰兒從非感染嬰兒區(qū)別開來，這些嬰兒的母親梅毒血清試驗(yàn)陽性，困難在于不能將母親體液免疫反應(yīng)同嬰兒的抗體反應(yīng)相區(qū)別，因?yàn)槟赣H的IgG可傳遞給胎兒。另外由于IgG終身存在，所以很難評價治療結(jié)果。血清學(xué)診斷常常又存在著假陽性。

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