以往的實(shí)驗(yàn)室檢查有梅毒螺旋體檢查,梅毒血清試驗(yàn)和腦脊液檢查。隨著基因診斷技術(shù)的發(fā)展,PCR技術(shù)應(yīng)用檢測梅毒螺旋體DNA,使梅毒的診斷變得準(zhǔn)確、快速、敏感。
一、梅毒螺旋體檢查
(一) 檢查方法
1.暗視野顯微鏡檢查:在皮損處,用玻片刮取組織滲出液或淋巴結(jié)穿刺液,見有活動的梅毒螺旋體。
2.免疫熒光染色:在熒光顯微鏡下可見綠色的梅毒螺旋體。
3.活體組織檢查梅毒螺旋體,如用銀染色法(Warthin-starry)法或(Levoaditis法)或熒光抗體染色,可查見梅毒螺旋體,呈黑褐色,有螺旋結(jié)構(gòu),位于真皮毛細(xì)血管周圍。銀染色的陽性結(jié)果需謹(jǐn)慎解釋,因?yàn)轭愃泼范韭菪w的其他物質(zhì)易混淆。而特異性熒光檢查則更為可靠。
(二) 螺旋體的鑒別
鏡下檢查梅毒螺旋體與雅司、地方性梅毒、品他三種非性病性螺旋體鑒別,此外還應(yīng)與齒大螺旋體、齒小螺旋體、軟螺旋體、生殖器螺旋體相鑒別。
1.雅司、地方性梅毒、品他三種非性病螺旋體:形態(tài)上不能與梅毒螺旋體相區(qū)別,但流行病學(xué)、病史、臨床表現(xiàn)可以鑒別;
2.齒大螺旋體:為疏螺旋體,比梅毒螺旋體長,存在于口腔中,尤其在齒縫內(nèi)最多;
3.齒小螺旋體:比梅毒螺旋體短,旋距也短,運(yùn)動不規(guī)則,兩端較中部略寬。主要見于齒垢中;
4.軟螺旋體:為疏螺旋體,螺旋較少,運(yùn)動不規(guī)律且快,常不斷改變其形態(tài)。寄生于皮膚潰瘍中。
5.生殖器螺旋體:比梅毒螺旋體短小,螺旋體大而不規(guī)則,生于陰垢內(nèi),不經(jīng)常清洗者檢出率較高。
6.其他:與螺旋形網(wǎng)狀纖維、纖維蛋白細(xì)絲、纖毛、串狀紅細(xì)胞等呈螺旋狀的物體相鑒別。
二、梅毒血清試驗(yàn)
根據(jù)所用抗原不同,梅毒血清試驗(yàn)分為以下兩大類:
(一) 非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn),用心磷脂作抗原,測定血清中抗心磷脂抗體,亦稱反應(yīng)素。本試驗(yàn)敏感性高而特異性較低,且易發(fā)生生物學(xué)假陽性。早期梅毒患者經(jīng)充分治療后,反應(yīng)素可以消失,早期未經(jīng)治療者到晚期,部分病人中反應(yīng)素也可以減少或消失。目前一般作為篩選和定量試驗(yàn),觀察療效,復(fù)發(fā)及再感染。
1.性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)(Venereal Disease Research Laboratory test,VDRL);用心磷脂、卵磷脂及膽固醇為抗原,可作定量及定性試驗(yàn),試劑及對照血清已標(biāo)準(zhǔn)化,費(fèi)用低。此法常用,操作簡單,需用顯微鏡讀取結(jié)果,缺點(diǎn)是一期梅毒敏感性不高。
2.快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn)(Rapid Plasma reagin test, RPR):是VDRL抗原的改良,敏感性及特異性與VDRL相似,優(yōu)點(diǎn)是肉眼即可讀出結(jié)果。
3.不加熱血清反應(yīng)素玻片試驗(yàn)(Unheated Serum Reagin USR)也是VDRL抗原的改良,敏感性及特異性與VDRL相似。
(二) 梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn):用活的或死的梅毒螺旋體或其成分來作抗原測定抗螺旋體抗體。這種試驗(yàn)敏感性和特異性均高,一般用作證實(shí)試驗(yàn)。這種試驗(yàn)是檢測血清中抗梅毒螺旋體IgG抗體,即使患者經(jīng)過足夠治療,仍能長期存在,甚至終身不消失,血清反應(yīng)仍持續(xù)存在陽性,因此,不能用于觀察療效。
1.熒光梅毒螺旋抗體吸收試驗(yàn)(FTA-ABS Test):此法是較敏感和較特異的螺旋體試驗(yàn)。
2.梅毒螺旋體血凝試驗(yàn)(TPHA):敏感性和特異性均高,操作簡便,但對一期梅毒不如FTA-ABS試驗(yàn)敏感。
3.梅毒螺旋體制動試驗(yàn)(Treponema Pallidum immobilization ,TPI);用Nichol株螺旋體(活的)加病人血清(含抗體)后,在補(bǔ)體的參與下可抑制螺旋體的活動。如≥50%梅毒螺旋體停止活動,則為陽性。此試驗(yàn)特異性、敏感性均高,但設(shè)備要求高,操作難,僅供研究用。
三、基因診斷技術(shù)檢測梅毒螺旋體
梅毒螺旋體不能進(jìn)行體外培養(yǎng)。檢測臨床標(biāo)本中梅毒螺旋體最敏感、可靠的方法是兔感染試驗(yàn)(RIT),RIT能證實(shí)活的梅毒螺旋體存在,是檢測梅毒螺旋體常用的標(biāo)準(zhǔn)方法。然而用RIT對新生兒或成人梅毒進(jìn)行常規(guī)診斷不切合實(shí)際。梅毒的血清學(xué)診斷對確定感染及治療很有意義,但對早期梅毒診斷不敏感,對先天性及神經(jīng)性梅毒的診斷不夠特異。血清學(xué)試驗(yàn)用作先天性梅毒的輔助診斷,其首要問題是將無癥狀感染嬰兒從非感染嬰兒區(qū)別開來,這些嬰兒的母親梅毒血清試驗(yàn)陽性,困難在于不能將母親體液免疫反應(yīng)同嬰兒的抗體反應(yīng)相區(qū)別,因?yàn)槟赣H的IgG可傳遞給胎兒。另外由于IgG終身存在,所以很難評價治療結(jié)果。血清學(xué)診斷常常又存在著假陽性。
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