一、熒光檢查的適應(yīng)癥
適應(yīng)癥:在皮膚病中適用于細菌、病毒、衣原體、支原體等病原體感染的快速診斷。舉例如下:
1、紅斑狼瘡是一種典型的自身免疫性結(jié)締組織病,多見于15~40歲女性。紅斑狼瘡是一種疾病譜性疾病,可分為盤狀紅斑狼瘡、亞急性皮膚型紅斑狼瘡、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、深在性紅斑狼瘡、新生兒紅斑狼瘡、藥物性紅斑狼瘡等亞型。熒光檢查法可對其進行有效的診斷。
2、皰疹樣皮炎是一種較為少見的慢性良性復(fù)發(fā)性大皰性皮膚病,病因不明。它的特點是反復(fù)發(fā)作、病程呈慢性經(jīng)過、皮疹形態(tài)多樣、對稱分布、劇烈瘙癢、預(yù)后良好。多發(fā)生于22~55歲。常有無癥狀的谷膠過敏性腸病。熒光檢查可對其進行快速的診斷。
3、在婦科里,熒光檢查 是將熒光物質(zhì)進入生殖系統(tǒng)靜脈血中,進行造影。簡單地說熒光物質(zhì)就是造影劑。 熒光檢查可以提高婦科檢查結(jié)果的準確性,有利于及時診斷病癥,起到早治療早康復(fù)的效果,更能進行宮頸癌和一些瘤變病癥的早期篩查,保護婦女健康。
二、熒光檢測的檢測方法
流式
優(yōu)點是速度快,非常適合做大數(shù)量統(tǒng)計,且樣品只被檢測一次,完全不用擔心熒光淬滅的問題。缺點是只能檢測熒光的有無、強度大小,無法提供空間定位信息,無法做熒光定位變化的實驗;由于樣品只被檢測一次,因此無法對同一個樣品進行連續(xù)觀察。例如,做膜蛋白定位時會得到這么一個結(jié)果——用流式可以檢測出信號,但是用顯微鏡卻看不到東西,排除儀器和濾光片選擇問題,很可能是核的自發(fā)熒光或非特異標記造成流式的假陽性結(jié)果。
熒光顯微鏡
剛好與流式互補,可很好地進行空間觀察,判斷目標蛋白的定位,但是不適合做大流量檢測,估計沒人能經(jīng)得起時間的考驗。有不同倍率的物鏡選擇,可以使用高倍物鏡看精細結(jié)構(gòu),或用小倍率物鏡做少量統(tǒng)計。與之搭配的CCD和軟件,是系統(tǒng)能否發(fā)揮性能的關(guān)鍵。尤其是CCD,從那么多商品里選一款合適的不容易,需要了解很多知識否則只能聽別人忽悠。
共聚焦
熒光顯微鏡的升級產(chǎn)品,具有很好的光學(xué)層切效果,能得到很好三維定位信息。但是,如果使用共聚焦的目的僅僅是為你的樣品拍一張靚照,取得一張好看的圖片,就讓人覺得可惜了。共聚焦基本都是全自動系統(tǒng),可隨意定義照明區(qū)域、選擇多個熒光通路和設(shè)定定時取圖,所以,做Time-laps、FRAP和FRET有其獨到的優(yōu)勢。另外,4Pi和STED又是其中的極品,具有超高的空間分辨率,只是使用不方便,未必適合做生物實驗。
全內(nèi)反射
熒光顯微鏡的另一種升級產(chǎn)品,屬于近場光學(xué)范疇,只適合且最適合做膜研究,無法看到胞內(nèi)信息。也是用CCD成像,但是對CCD的要求更高——個人甚至覺得對CCD的要求是沒有上限的。
雙光子
另一種共聚焦,因使用長波激發(fā)熒光,故能做深層檢測(突破共聚焦的100微米極限),最典型的應(yīng)用是觀察活體腦組織。巨貴無比,國內(nèi)沒有幾臺,能用上的人不多——就不說了。
高內(nèi)涵藥篩系統(tǒng)
流式和顯微鏡的雜合體,使用電動載物臺,可以自動地按預(yù)定程序完成實驗,可做大流量檢測(雖然速度慢點),而且有成像能力,可以判斷定位。前段時間,國內(nèi)哪裝了第一臺,很多人在吹,但我實在不知道其中的好處——任何一臺帶電動載物臺的顯微鏡都可以達到相似的效果。
三、熒光檢查法的使用器械
醫(yī)用熒光棒是一種化學(xué)發(fā)光的照明光源,把醫(yī)用熒光棒貼在陰道擴張器葉片內(nèi)側(cè),作為進行陰熒光視診的照明光源,用于婦科常規(guī)檢查、宮頸癌及癌前病變的篩查,本產(chǎn)品為一次性使用產(chǎn)品,不與人體接觸,無毒、無放射性。其注意事項如下:
1、醫(yī)用熒光棒被折斷并活化后的幾分鐘內(nèi),熒光光源最為明亮,如果熒光視診未在15分鐘最佳觀察時間內(nèi)完成,則需更換熒光檢查棒;
2、用醫(yī)用熒光檢查棒檢查有無出現(xiàn)醋酸白病變區(qū),可重復(fù)用3-5%醋酸溶液涂抹于宮頸,以便幫助從黏液中區(qū)分醋酸白病變區(qū)域
3、有時熒光光源發(fā)出的光會發(fā)生宮頸反光,輕輕移動擴陰器,白色區(qū)域如果出現(xiàn)移動,那么就是熒光光源造成的反射光,或者用一個小棉球輕壓醋酸白病變區(qū),用這種方法改變宮頸的輪廓,這樣可以幫助區(qū)別是熒光光源還是真正的醋酸白病變;
4、化學(xué)熒光視診不用于醋酸白病變的分級;
5、醫(yī)用熒光檢查棒中的液體不可食用,且具有一定黏附性,出現(xiàn)漏液,請勿使用,并清洗雙手;嚴禁弄破醫(yī)用熒光棒,以免棒內(nèi)液體泄漏。
6、醫(yī)用熒光棒不污染衣物,可放心使用。
四、熒光檢測有哪些特點
熒光定量:采用國際主流的熒光定量PCR技術(shù),迅速提升技術(shù)水平。
結(jié)果穩(wěn)定:檢測結(jié)果CV值與進口全自動PCR儀接近,具有自檢功能,避免錯誤數(shù)據(jù)的輸出。
封閉操作:全部檢測過程均為閉管操作,于反應(yīng)管處檢測熒光,有效防止污染,解決PCR技術(shù)中最棘手之難題。
準確定量:滿足臨床對量化的需求,定量蕩圍寬,可涵蓋大部分病原微生物,自動曲線擬合。
靈敏度高:利用光譜信號靈敏性的優(yōu)勢,有效提高檢測靈敏度。
安全:全程無毒檢測。
操作簡便:省去后處理的煩瑣過程。
直接打?。褐苯哟蛴〗Y(jié)果,無須記錄大量數(shù)據(jù)。
升級版:FS1000有與電腦連接的數(shù)傳輸口,可以連接電腦,根據(jù)用戶需要提供先進分析軟件,全面分析實驗數(shù)據(jù)。(電腦和打印機選配件)
故障率低:維護非常簡單。
節(jié)約資源:可利用現(xiàn)用PCR擴增儀,最大限度節(jié)約資源。
眼底有豐富的血管,由于某些原因會使眼底產(chǎn)生病變,從而造成視力的下降。為了觀察眼底血管的狀況,眼科醫(yī)生經(jīng)常采用眼底熒光血管造影的方法。將被檢眼充分散瞳,從肘前靜脈快速注入熒光素后,用裝有特定濾光片組合的眼底照相機,專門拍攝眼底血管中熒光素循行時吸收激發(fā)光線后所發(fā)射出的熒光。眼底熒光素經(jīng)過的地方能使膠片感光而顯影,從而了解眼底微循環(huán)結(jié)構(gòu)及各種生理病理變化,為多種眼底疾病的診斷、治療、療效觀察和機制研究提供有價值的資料。
近期還有人研制出了一些新型造影方法,如靶染料釋放系統(tǒng)眼底血管造影、脂質(zhì)體空泡系統(tǒng)眼底血管造影、吖啶橙眼底血管造影等,但還未普遍用于臨床。
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