直擊CSCO腫瘤免疫治療,聚焦腫瘤免疫治療未來(lái)發(fā)展

直擊CSCO腫瘤免疫治療,聚焦腫瘤免疫治療未來(lái)發(fā)展

2016年09月25日訊 9月21日-25日，第十九屆全國(guó)臨床腫瘤學(xué)大會(huì)暨2016年CSCO學(xué)術(shù)年會(huì)在廈門(mén)召開(kāi)，來(lái)自全國(guó)腫瘤臨床及科研領(lǐng)域的學(xué)者們共聚一堂，就我國(guó)腫瘤治療的趨勢(shì)及發(fā)展進(jìn)行了深入探討和交流。腫瘤免疫治療作為近年來(lái)備受關(guān)注的創(chuàng)新治療方案，再次成為了本屆CSCO大會(huì)的熱點(diǎn)。

作為腫瘤免疫治療的先行者，百時(shí)美施貴寶在本屆大會(huì)上集中展示了多項(xiàng)腫瘤免疫治療研究成果，展現(xiàn)了免疫檢查點(diǎn)抑制劑在肺癌、肝細(xì)胞癌等領(lǐng)域的研究數(shù)據(jù)。

聚焦高發(fā)瘤種，專(zhuān)注中國(guó)患者需求

資料顯示，過(guò)去10年，我國(guó)癌癥發(fā)病率和死亡率均呈明顯上升趨勢(shì)。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，2015年中國(guó)癌癥新發(fā)病例和死亡病例分別達(dá)到429萬(wàn)例和281萬(wàn)例，其中發(fā)病率和死亡率最高的均為肺癌，肝癌列惡性腫瘤死亡率第二位。

立足于中國(guó)惡性腫瘤發(fā)病現(xiàn)狀，百時(shí)美施貴寶開(kāi)展了腫瘤免疫治療藥物的研究，并在本屆CSCO大會(huì)上分享了PD-1抑制劑Nivolumab在肺癌、肝癌等治療領(lǐng)域的研究成果：

肺癌：在晚期非小細(xì)胞肺癌鱗癌和非鱗癌經(jīng)治人群中，CheckMate 017/ 057研究2年隨訪(fǎng)數(shù)據(jù)證實(shí)Nivolumab治療與多西他賽治療相比，可以達(dá)到持久、長(zhǎng)期的OS（總生存期）和PFS（無(wú)進(jìn)展生存期）；OS率分別為鱗癌 23% （Nivolumab） vs 8% （多西他賽）；非鱗癌 29%（Nivolumab） vs 16%（多西他賽）；分別有16%和12%的Nivolumab治療患者在2年時(shí)存活且疾病無(wú)進(jìn)展，而多西他賽治療患者中僅有≤3%和1%達(dá)到這一狀態(tài)；在安全性方面，Nivolumab的安全性特征均優(yōu)于多西他賽，所有等級(jí)和3-4級(jí)治療相關(guān)性AE（不良事件）發(fā)生率均較低，且未觀察到新的安全性問(wèn)題。

肝癌：有關(guān)Nivolumab在治療晚期肝細(xì)胞癌的安全性和抗腫瘤活性研究，I / II期劑量遞增研究的中期分析（CheckMate 040）表明，Nivolumab單藥治療肝細(xì)胞癌患者（包括合并HBV或HCV感染的患者）安全性可控，擴(kuò)展研究中期的初步結(jié)果顯示，目前觀察到的9 個(gè)月OS 率為71%。

腫瘤免疫治療：滿(mǎn)足未盡醫(yī)療需求臨床產(chǎn)品組合

腫瘤治療的目標(biāo)是大幅度延長(zhǎng)患者生命，并確?；颊叩纳钯|(zhì)量達(dá)到可能的最佳程度，隨著腫瘤發(fā)病形勢(shì)日益嚴(yán)峻，傳統(tǒng)的治療方法無(wú)法完全滿(mǎn)足治療需求。近年來(lái)，腫瘤免疫治療逐漸進(jìn)入公眾視野，目前在某些國(guó)家特定的癌癥類(lèi)型中，腫瘤免疫治療已經(jīng)成為和手術(shù)、放療、化療和靶向治療并重的一種治療方式，有望不斷提升難治癌癥的生存預(yù)期，并改善癌癥患者的生活質(zhì)量。

腫瘤的免疫治療是通過(guò)激發(fā)和增強(qiáng)機(jī)體抗腫瘤的免疫應(yīng)答來(lái)協(xié)同機(jī)體免疫系統(tǒng)殺傷腫瘤、抑制腫瘤生長(zhǎng)，是一種利用患者自身免疫系統(tǒng)對(duì)抗腫瘤的治療方式。腫瘤的免疫治療分為被動(dòng)免疫治療和主動(dòng)免疫治療兩類(lèi)。I-O（Immuno-Oncology） 治療是主動(dòng)免疫治療的主要手段之一。目前國(guó)際上I-O治療的主要研究方向是免疫檢查點(diǎn)抑制劑，有代表性的包括PD-1/PD-L1抑制劑和CTLA-4拮抗劑。

創(chuàng)新驅(qū)動(dòng)，推進(jìn)腫瘤治療未來(lái)發(fā)展

本屆CSCO大會(huì)上，百時(shí)美施貴寶通過(guò)現(xiàn)場(chǎng)及虛擬展廳向參會(huì)及全國(guó)腫瘤專(zhuān)家全方位展示了其在IO領(lǐng)域的研究進(jìn)展，深入淺出地詮釋了I-O治療的作用機(jī)制，并展現(xiàn)了未來(lái)強(qiáng)大的產(chǎn)品線(xiàn)。據(jù)悉，百時(shí)美施貴寶目前正在進(jìn)行的I-O治療臨床項(xiàng)目著眼于廣泛的患者人群，涵蓋多種實(shí)體瘤、各線(xiàn)治療和不同的組織病理學(xué)，以期獲得更久的總生存期和持久應(yīng)答率等重要指標(biāo)。

除了已上市的抗CTLA-4和抗PD-1藥物外，百時(shí)美施貴寶目前在研的免疫系統(tǒng)通路還包括CD-137、KIR等其他通路的研究。這些通路可能會(huì)產(chǎn)生聯(lián)合治療和單藥治療的新療法，幫助患者抗擊不同類(lèi)型的腫瘤。百時(shí)美施貴寶中國(guó)開(kāi)發(fā)部負(fù)責(zé)人阮卡淳博士表示：“東方和西方國(guó)家在一些特定瘤腫上存在不同的治療需求。秉持以患者為中心的理念，我們將進(jìn)一步關(guān)注中國(guó)腫瘤患者群體，加強(qiáng)與各方的緊密合作，更快更高效地將符合中國(guó)患者需求的產(chǎn)品帶入國(guó)內(nèi)，為中國(guó)患者帶來(lái)新的希望。”

對(duì)于腫瘤，免疫治療究竟有哪些厲害手段？

文/Dailei
2018諾貝爾生理或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)，腫瘤免疫治療又上新臺(tái)階！

2018年諾貝爾生理或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)得主為美國(guó)科學(xué)家James P. Allison和日本科學(xué)家Tasuku Honjo，獲獎(jiǎng)原因是for their discovery of cancer therapy by inhibitionn of negative immune regulation（發(fā)現(xiàn)免疫檢查點(diǎn)抑制癌癥療法）。換句話(huà)說(shuō)，人們發(fā)現(xiàn)了如何通過(guò)增強(qiáng)機(jī)體免疫力來(lái)治療腫瘤。

那么腫瘤的免疫治療究竟有哪些呢？接下來(lái)讓我們挑重點(diǎn)來(lái)看一看！

簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)就是 “打疫苗” ，你可以打整個(gè)腫瘤細(xì)胞，可以打腫瘤細(xì)胞的某個(gè)分子以及它的DNA。你肯定會(huì)有疑問(wèn)，直接打腫瘤細(xì)胞，那這個(gè)人不就得腫瘤了嗎？這個(gè)問(wèn)題問(wèn)得很好，科學(xué)家們也都想到了這個(gè)問(wèn)題，所以我們打入體內(nèi)的“疫苗”都經(jīng)過(guò)基因修飾處理的。

通過(guò)基因修飾（MHC分子、協(xié)同刺激分子、CK/CKR、AM、腫瘤抗原）， 可以使癌細(xì)胞的致瘤性下降，免疫原性提高 。也就是說(shuō)，我們?nèi)藶橄魅醢┘?xì)胞攻擊力，并且給癌細(xì)胞打上更加顯而易見(jiàn)的標(biāo)識(shí)，讓T細(xì)胞輕松識(shí)別腫瘤細(xì)胞。

腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)染B7基因后，腫瘤細(xì)胞的的免疫原性增強(qiáng)。沒(méi)有轉(zhuǎn)染B7基因，腫瘤的大小持續(xù)增長(zhǎng)直到老鼠死亡；轉(zhuǎn)染B7基因后，CD8+T細(xì)胞的活性更強(qiáng)，腫瘤大小緩慢增加并且迅速下降。

其中，最經(jīng)典的就是HPV疫苗，絕大多數(shù)的子宮頸癌都與HPV感染有關(guān)。目前最常用的HPV疫苗包括二價(jià)、四價(jià)和九價(jià)疫苗，“價(jià)”代表了疫苗可以預(yù)防的病毒種類(lèi)。數(shù)字越高，說(shuō)明可以預(yù)防的病毒越多。

目前已經(jīng)上市的HPV疫苗均為預(yù)防性的疫苗，是利用病毒上的一種特別的蛋白外殼來(lái)引發(fā)免疫力，其本身是蛋白，而不是病毒，沒(méi)有病毒的功能，故不會(huì)造成病毒感染。

簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)就是“ 腫瘤特異性抗體治療 ”，我們直接把有用的抗體打進(jìn)去，2018年的諾貝爾生理或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)就與此相關(guān)。

腫瘤細(xì)胞可是非常的精明，T細(xì)胞要來(lái)殺我，我絕不會(huì)坐以待斃。它通過(guò)表達(dá)PD-L1與T細(xì)胞表面的PD-1結(jié)合，從而導(dǎo)致T細(xì)胞被抑制發(fā)揮不了功能。日本科學(xué)家Tasuku Honjo于1992年發(fā)現(xiàn)T細(xì)胞抑制受體PD-1，從而獲得今年的諾貝爾獎(jiǎng)。

科學(xué)家就針對(duì)PD-1和PD-L1設(shè)計(jì)抗體，用抗體先把位置占據(jù)，阻斷PD-1/PD-L1信號(hào)途徑，讓腫瘤細(xì)胞無(wú)法抑制T細(xì)胞活性，從而加強(qiáng)T細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷。

2014年以來(lái)，PD-1抗體和PD-L1抗體先后獲得FDA的上市批準(zhǔn)。截止當(dāng)前，PD-1抗體已經(jīng)獲批在9種適應(yīng)征中使用，幾乎涉及了所有癌癥種類(lèi)。美國(guó)科學(xué)家James P. Allison則是發(fā)現(xiàn) CTLA-4抗體 可增強(qiáng)免疫并治療腫瘤，從而獲得今年的諾貝爾獎(jiǎng)。

此外，治療腫瘤最火的另一個(gè)領(lǐng)域就是 CAR-T 。 CAR-T，簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)就是攜帶CAR的T細(xì)胞。

基因治療目前還只是停留在設(shè)想階段，直接修改基因是一件很冒風(fēng)險(xiǎn)的事，你不知道你一刀下去把基因的哪個(gè)地方切下來(lái)，也不知道會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生什么影響，這個(gè)需要等待技術(shù)的進(jìn)一步升級(jí)換代才能夠?qū)崿F(xiàn)。但是，我們有研究的大方向：

腫瘤免疫學(xué)是研究腫瘤及其相關(guān)分子的免疫原性、機(jī)體對(duì)腫瘤的免疫應(yīng)答、機(jī)體免疫功能與腫瘤發(fā)生、發(fā)展的相互關(guān)系以及腫瘤的免疫學(xué)診斷和免疫防治的科學(xué)。

腫瘤免疫學(xué)雖然沒(méi)有什么深厚的歷史文化積淀，但是新興的它正給無(wú)數(shù)的人們帶來(lái)治愈腫瘤的希望。希望每個(gè)人都至少擁有百歲人生！

肺癌進(jìn)入免疫治療時(shí)代，目前已有8種免疫藥物

所屬企業(yè)： 默沙東制藥

2019年，Keytruda又再獲批三項(xiàng)適應(yīng)癥，分別為：一線(xiàn)治療表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）陰性和間變性淋巴瘤激酶（ALK）陰性的轉(zhuǎn)移性非鱗狀非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）、一線(xiàn)治療PD-L1表達(dá)陽(yáng)性且無(wú)特定基因突變的局部晚期或轉(zhuǎn)移性NSCLC以及一線(xiàn)治療轉(zhuǎn)移性鱗狀NSCLC。

9月22日，2020年歐洲腫瘤內(nèi)科學(xué)會(huì)年會(huì)(ESMO)會(huì)議期間披露了相關(guān)腫瘤研究數(shù)據(jù)，其中關(guān)于腫瘤免疫治療“K藥”的KEYNOTE-024研究對(duì)于晚期肺癌患者5年生存率的更新引發(fā)關(guān)注：在PD-L1表達(dá)陽(yáng)性(TPS 50%)的患者中，K藥單藥一線(xiàn)治療將5年生存率提高到31.9%。

所屬企業(yè)： 百時(shí)美施貴寶

2018年6月15日，百時(shí)美施貴寶PD-1單抗藥物納武單抗的中國(guó)上市申請(qǐng)正式獲得CFDA批準(zhǔn)，用于二線(xiàn)治療非小細(xì)胞肺癌。

納武單抗在完成Ⅰ期安全評(píng)估后，一項(xiàng)Ⅱ期試驗(yàn)招募 117 例二線(xiàn)及以后治療狀態(tài)的晚期肺鱗癌患者接受納武單抗單藥治療，客觀緩解率（ORR）達(dá) 14.5%，中位生存期（mOS）為 8.2 個(gè)月，一年生存率（OSR）為 40.8%。

所屬企業(yè)： 君實(shí)生物

2019年10月21日，CDE官網(wǎng)顯示君實(shí)生物的特瑞普利單抗獲批臨床，用于聯(lián)合化療在可切除的IIIA期非小細(xì)胞肺癌患者的新輔助治療。

根據(jù)君實(shí)在WCLC2019大會(huì)上公布的特瑞普利單抗在肺癌領(lǐng)域的首個(gè)臨床數(shù)據(jù)顯示，特瑞普利單抗聯(lián)合卡鉑/培美曲塞具有良好的抗腫瘤療效，客觀緩解率（ORR）為50%，疾病控制率（DCR）達(dá)到87.5%；中位緩解持續(xù)時(shí)間（DoR）7.0個(gè)月；整體人群的中位無(wú)進(jìn)展生存期（PFS）為7.0個(gè)月。亞組分析看到PD-L1陽(yáng)性患者，ORR為60%，中位PFS達(dá)到8.2個(gè)月。

所屬企業(yè)： 阿斯利康

2019年12月，德瓦魯單抗的上市申請(qǐng)獲得CDE承辦受理。PACIFIC研究分析了III期不可手術(shù)切除的局晚期NSCLC患者，在同步放化療后使用PDL1單抗I藥?kù)柟讨委熞荒甑寞熜А?年的OS（總生存期）I藥（durvalumab）組的中位OS明顯比安慰劑組更長(zhǎng)，為NR（未達(dá)到）vs 29.1m。兩組3年OS率分別為I藥57% vs 安慰劑43.5%，這意味著超過(guò)半數(shù)的局晚期患者用I藥成功活過(guò)了3年，與安慰劑相比多出了13.5%的存活患者。

所屬企業(yè)： 百濟(jì)神州

2020年4月和6月,國(guó)家藥品監(jiān)督管理局(NMPA)受理PD-1單抗百澤安用于一線(xiàn)治療晚期鱗狀非小細(xì)胞肺癌(sq-NSCLC)患者和一線(xiàn)治療晚期非鱗狀非小細(xì)胞肺癌(nsq-NSCLC)患者的適應(yīng)證上市申請(qǐng)

與單純化療相比，替雷利珠單抗聯(lián)合化療治療的患者客觀緩解率（ORR）更高（73/75% vs 50%）；替雷利珠單抗聯(lián)合化療后，有更多的患者出現(xiàn)了腫瘤明顯縮小的現(xiàn)象。并且緩解持續(xù)時(shí)間（DoR）更長(zhǎng)（8.2/8.6m vs 4.2m)。雖然有49.6%的化療組患者在治療后出現(xiàn)緩解，但是緩解時(shí)間平均只有4.2個(gè)月；相比之下，經(jīng)過(guò)替雷利珠單抗聯(lián)合化療治療的患者，緩解時(shí)間中位數(shù)分別提高到8.2個(gè)月和8.6個(gè)月。

所屬企業(yè)： 羅氏

2020年02月，阿替利珠單抗在國(guó)內(nèi)獲批上市，用于聯(lián)合化療一線(xiàn)治療廣泛期小細(xì)胞肺癌。在非小細(xì)胞肺癌方面，阿替利珠單抗一線(xiàn)同樣獲得了很好的臨床療效。

IMpower110是一項(xiàng)III期、開(kāi)放性、隨機(jī)對(duì)照、全球多中心臨床試驗(yàn)，對(duì)比了阿替利珠單抗單藥和標(biāo)準(zhǔn)含鉑方案化療一線(xiàn)治療經(jīng)PD-L1篩選的572例晚期NSCLC患者。結(jié)果顯示，對(duì)于腫瘤細(xì)胞PD-L1表達(dá) 50%，腫瘤浸潤(rùn)免疫細(xì)胞的PD-L1表達(dá) 10%的患者，與化療相比，阿替利珠單抗單藥顯著延長(zhǎng)了總生存期（20.2個(gè)月 vs 13.1個(gè)月）。同樣顯著延長(zhǎng)了中位無(wú)進(jìn)展生存期（8.1個(gè)月 vs 5.0個(gè)月）。在安全性方面來(lái)說(shuō)，阿替利珠單抗不良反應(yīng)明顯低于聯(lián)合化療。

所屬企業(yè)： 恒瑞醫(yī)藥（其子公司蘇州盛迪亞生物醫(yī)藥）

2020年6月19日,由恒瑞醫(yī)藥自主研發(fā)的PD-1抑制劑卡瑞利珠單抗(商品名:艾瑞卡)，獲得國(guó)家藥品監(jiān)督管理局(NMPA)批準(zhǔn)用于肺癌、食管癌領(lǐng)域治療,成為國(guó)內(nèi)首個(gè)獲批肺癌及食管癌適應(yīng)癥的國(guó)產(chǎn)PD-1抑制劑。

獲批的肺癌適應(yīng)癥為“卡瑞利珠單抗聯(lián)合培美曲塞和卡鉑用于表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）基因突變陰性和間變性淋巴瘤激酶（ALK）陰性的、不可手術(shù)切除的局部晚期或轉(zhuǎn)移性非鱗狀非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）的一線(xiàn)治療”。

CameL研究是一項(xiàng)III期對(duì)照研究，納入的所有患者都源自中國(guó)人群，CameL研究中卡瑞利珠單抗聯(lián)合化療組對(duì)比化療組，ORR為60%vs39.1%，全人群的中位PFS為11.3個(gè)月vs8.3個(gè)月，PD-L1陽(yáng)性人群的中位PFS為15.2個(gè)月vs9.9個(gè)月，OS尚未成熟，但已經(jīng)有獲益的趨勢(shì)。

所屬企業(yè)： 信達(dá)生物和禮來(lái)制藥

2020年4月24日，信達(dá)生物和禮來(lái)制藥共同宣布：國(guó)家藥品監(jiān)督管理局（NMPA）已經(jīng)正式受理雙方共同開(kāi)發(fā)的創(chuàng)新PD-1抑制劑達(dá)伯舒（信迪利單抗注射液）用于非鱗狀非小細(xì)胞肺癌一線(xiàn)治療的新適應(yīng)癥申請(qǐng)。

此次適應(yīng)癥申請(qǐng)基于ORIENT-11的III期對(duì)照臨床研究。對(duì)照研究顯示，顯著延長(zhǎng)了無(wú)進(jìn)展生存期（PFS），達(dá)到預(yù)設(shè)的優(yōu)效性標(biāo)準(zhǔn)。截至期中分析數(shù)據(jù)截止日，中位隨訪(fǎng)時(shí)間為8.9個(gè)月，試驗(yàn)組和對(duì)照組由獨(dú)立影像學(xué)評(píng)審委員會(huì)評(píng)估的中位無(wú)進(jìn)展生存期分別為8.9個(gè)月和5.0個(gè)月，HR（95%CI）=0.482（0.362,0.643），P 0.00001。安全性特征與既往報(bào)道的達(dá)伯舒（信迪利單抗注射液）研究結(jié)果一致，無(wú)新的安全性信號(hào)。

中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院內(nèi)科主任醫(yī)師李峻嶺介紹，肺癌的免疫治療首先需要剔除掉驅(qū)動(dòng)基因敏感突變的患者，主要是EGFR敏感突變及ALK陽(yáng)性肺癌。野生型的患者不適合靶向治療，多可以接受免疫檢查點(diǎn)抑制劑治療，對(duì)于PDL1高表達(dá)的患者可以單獨(dú)接受免疫檢查點(diǎn)抑制劑治療，多數(shù)患者為免疫檢查點(diǎn)抑制劑聯(lián)合化療。部分局部晚期肺癌患者通過(guò)免疫檢查點(diǎn)抑制劑聯(lián)合化療誘導(dǎo)治療后降低期別接受手術(shù)治療。局部晚期肺癌在同步化放療之后，用免疫檢查點(diǎn)抑制劑進(jìn)行鞏固性治療?，F(xiàn)在免疫治療選擇的手段也是越來(lái)越多。

關(guān)于肺癌的免疫治療，中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院內(nèi)科主任王潔認(rèn)為，肺癌免疫治療已覆蓋全線(xiàn)，給晚期患者走向慢性病的進(jìn)程帶來(lái)了希望，同時(shí)也增加了早期患者治愈的可能。

“我相信可手術(shù)的中早期非小細(xì)胞肺癌的圍術(shù)期免疫治療可以使患者生存得到明顯延長(zhǎng)?！笔锥坚t(yī)科大學(xué)宣武醫(yī)院胸外科主任張毅主任認(rèn)為，不同于當(dāng)年肺癌靶向藥陸續(xù)上市的平和，從去年開(kāi)始，免疫藥物短短時(shí)間里發(fā)展非常迅猛，肺癌的免疫治療開(kāi)啟了一個(gè)新時(shí)代。對(duì)于中早期非小細(xì)胞肺癌術(shù)前新輔助免疫治療，國(guó)內(nèi)外多項(xiàng)臨床研究顯示出非常好的療效，部分患者甚至達(dá)到了完全病理緩解。

“雖然免疫治療使晚期肺癌的治愈率由3%提高到30%左右。而早期肺癌，特別是小于1cm的病灶，手術(shù)治療的治愈率也達(dá)到了90%~95%。但是，我們依舊建議大家特別關(guān)注 健康 體檢，定期（1~2年）進(jìn)行胸部CT篩查，在肺癌的最早期發(fā)現(xiàn)病灶，在肺癌的最早期進(jìn)行手術(shù)治療，才能達(dá)到以最少的花費(fèi)、最短的時(shí)間、最小的精神創(chuàng)傷治愈肺癌?！碧旖蚴蟹伟┰\治中心主任王長(zhǎng)利說(shuō)道。

未來(lái)的發(fā)展方向應(yīng)該關(guān)注于如何能讓不太適合免疫治療的患者變成適合免疫治療的患者。李峻嶺表示，“我個(gè)人認(rèn)為，尋找到合適的人群，規(guī)避可能出現(xiàn)的風(fēng)險(xiǎn)，增加生物標(biāo)志物的檢測(cè)，可以使得更多的可能從中獲益的患者接受免疫治療?！?/p>

空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)在腫瘤免疫治療中的應(yīng)用潛力

腫瘤內(nèi)異質(zhì)性對(duì)癌癥患者的準(zhǔn)確診斷和個(gè)性化治療策略的制定提出了重大挑戰(zhàn)。此外，這種異質(zhì)性可能是治療耐藥性、疾病進(jìn)展和癌癥復(fù)發(fā)的基礎(chǔ)。雖然免疫療法可以獲得很高的成功率，但選擇壓力加上腫瘤內(nèi)部的動(dòng)態(tài)進(jìn)化推動(dòng)耐藥克隆的出現(xiàn)，使腫瘤在某些患者中持續(xù)存在。 為了提高免疫療法的療效，研究人員已經(jīng)使用空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)來(lái)識(shí)別并隨后阻斷腫瘤異質(zhì)性的來(lái)源。

原位雜交(ISH)是一種使細(xì)胞或組織中特定DNA或RNA分子可視化的分子技術(shù)。ISH是基于DNA/DNA或DNA/RNA雙鏈的互補(bǔ)性，將標(biāo)記的核酸探針原位雜交到目標(biāo)上。通過(guò)這種方式，我們可以獲得有用的空間信息。

FISH是檢測(cè)微生物、診斷實(shí)體瘤和血液瘤以及指導(dǎo)癌癥治療的有效臨床工具。例如，F(xiàn)ISH通常用于檢測(cè)慢性髓系白血病中的BCR-ABL1 t（9；22）易位和各種癌癥中的許多融合基因。FISH還被用于確認(rèn)乳腺癌中HER2基因的擴(kuò)增，從而確定最有可能受益于曲妥珠單抗（一種抗HER2的單克隆抗體）治療的患者。另一個(gè)重要的例子是在非小細(xì)胞肺癌中檢測(cè)EML4-ALK融合基因。隨著越來(lái)越多的免疫療法被開(kāi)發(fā)和批準(zhǔn)，研究人員試圖用FISH來(lái)預(yù)測(cè)癌癥免疫治療的反應(yīng)性。 為了擴(kuò)大FISH的有效性，可以將FISH與IHC或IF結(jié)合起來(lái)，同時(shí)檢測(cè)不同細(xì)胞類(lèi)型的RNA和蛋白質(zhì)，以更好地表征腫瘤微環(huán)境（TME）。

為了解決傳統(tǒng)FISH的局限性，研究人員從研究DNA轉(zhuǎn)移到研究單分子RNA，并采用高通量的方法，由此產(chǎn)生了smFISH技術(shù)，其能夠可視化和量化單個(gè)mRNA分子，并表征內(nèi)源性基因表達(dá)的空間模式。 通過(guò)靶向細(xì)胞mRNA而不是DNA分子，smFISH已經(jīng)成為評(píng)估腫瘤內(nèi)轉(zhuǎn)錄異質(zhì)性的有力工具。

RNAscope是一種商業(yè)化的基于ISH的技術(shù)，可以檢測(cè)多達(dá)12個(gè)不同的RNA靶點(diǎn)，并且可以方便地與IHC和/或IF結(jié)合，以自動(dòng)化的方式同時(shí)研究RNA和蛋白質(zhì)。相對(duì)于其他基于FISH的技術(shù)，RNAscope已經(jīng)設(shè)計(jì)了13000個(gè)以上的RNA探針，并通過(guò)商業(yè)化的流程進(jìn)行驗(yàn)證。因此，它是一種用于基礎(chǔ)研究和臨床實(shí)驗(yàn)的省時(shí)和友好的方法。 RNAscope已經(jīng)廣泛應(yīng)用于各個(gè)學(xué)科，包括傳染病、癌癥、免疫治療、炎癥和神經(jīng)科學(xué)。 特別是，它是IHC的一種強(qiáng)有力的替代方法，可以評(píng)估各種實(shí)體瘤中免疫檢查點(diǎn)的表達(dá)，如PD-L1。通過(guò)檢測(cè)特定RNA，RNAscope闡明了TME、免疫逃逸機(jī)制以及新的預(yù)測(cè)和預(yù)后癌癥生物標(biāo)志物。

在免疫療法的背景下，RNAscope在理解CAR-T細(xì)胞療法方面發(fā)揮了寶貴的作用。 RNAscope已被用于評(píng)估靶基因表達(dá)的特異性，并跟蹤C(jī)AR-T細(xì)胞在異種移植小鼠模型中的分布。擴(kuò)展到人類(lèi)樣本，已有研究驗(yàn)證了BCMA的表達(dá)是多發(fā)性骨髓瘤CAR-T細(xì)胞免疫治療的靶點(diǎn)。

盡管可以從RNAscope等技術(shù)中獲得更高的靈敏度和特異性，但最終需要基于FISH的技術(shù)，允許進(jìn)行高通量轉(zhuǎn)錄組分析，以更好地表征顯示獨(dú)特基因表達(dá)譜的稀有細(xì)胞群和細(xì)胞類(lèi)型。 MERFISH和seqFISH，不僅提供了改進(jìn)的RNA定量、信號(hào)放大和檢測(cè)，而且提供了基于圖像的轉(zhuǎn)錄組分析。

MERFISH從smFISH改良而來(lái)，采用了基于條形碼的組合標(biāo)記方法，然后進(jìn)行多輪雜交，以確保熒光信號(hào)的高亮度和一次可檢測(cè)到的大量RNA。

seqFISH是另一種基于連續(xù)幾輪條形碼雜交標(biāo)記的Multiplexed smFISH技術(shù) 。 例如，seqFISH被用來(lái)對(duì)小鼠胚胎干細(xì)胞和腦組織中>10000種mRNA進(jìn)行成像，具有較高的準(zhǔn)確性和分辨率。相關(guān)研究已證明seqFISH是研究和獲得T細(xì)胞成熟過(guò)程中調(diào)控基因表達(dá)動(dòng)態(tài)的有力工具。另一項(xiàng)研究將微流體技術(shù)與Multiplexed smFISH技術(shù)結(jié)合起來(lái)研究乳腺癌中的腫瘤異質(zhì)性證明，Multiplexed smFISH可以從不同角度進(jìn)一步優(yōu)化。

盡管smFISH技術(shù)前景廣闊，但由于探針設(shè)計(jì)、驗(yàn)證、圖像分析和解碼的復(fù)雜性，基于smFISH的復(fù)合技術(shù)尚未廣泛應(yīng)用于轉(zhuǎn)化研究或臨床應(yīng)用。使用非多重FISH、定量PCR、IHC和IF在mRNA或蛋白質(zhì)水平上研究單個(gè)基因的表達(dá)通常更為方便，尤其是當(dāng)研究的基因數(shù)量較少時(shí)，如一組預(yù)后標(biāo)志物。另一個(gè)限制是，由于序列雜交的性質(zhì)，總成像時(shí)間加起來(lái)至少為18小時(shí)，還不包括最初的36~48h的探針雜交時(shí)間，因此與其他技術(shù)相比（如DSP和Visium），總體通量較低。此外，Multiplexed?smFISH技術(shù)只能評(píng)估新鮮冷凍組織中一種類(lèi)型的分析物，如RNA。新興的技術(shù)如DSP，可以評(píng)估新鮮冷凍組織和病理學(xué)常規(guī)使用的標(biāo)準(zhǔn)福爾馬林固定石蠟包埋（FFPE）組織中的蛋白質(zhì)和RNA。

DSP是一種高復(fù)雜度的空間分析方法，其克服了Multiplexed smFISH技術(shù)的主要限制。DSP使用寡核苷酸檢測(cè)技術(shù)來(lái)量化FFPE組織樣本中的蛋白質(zhì)或RNA。

與順序雜交技術(shù)（如MERFISH）不同，DSP提供了更高效的工作流程，可在48小時(shí)內(nèi)從10~20個(gè)組織切片或多達(dá)384個(gè)目標(biāo)區(qū)域產(chǎn)生結(jié)果。此外，與只分析RNA的Multiplexed smFISH相比，DSP可以同時(shí)檢測(cè)96種蛋白質(zhì)或1400個(gè)mRNA。這一特征與癌癥免疫治療特別相關(guān)，因?yàn)閙RNA和蛋白質(zhì)表達(dá)模式的差異可用于闡明轉(zhuǎn)錄后調(diào)控和翻譯后修飾，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)不穩(wěn)定，影響預(yù)后和治療反應(yīng)。同時(shí)，DSP還保存了組織樣本的完整性，可以?xún)?chǔ)存珍貴的樣本，并用于將來(lái)的進(jìn)一步分析。

DSP在免疫治療領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用，例如已有研究用DSP評(píng)價(jià)了接受化學(xué)免疫治療的彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤患者的免疫微環(huán)境；DSP在免疫檢查點(diǎn)阻斷治療方面也有研究，包括抗PD-L1和抗PD-1治療。DSP可以作為一種輔助診斷工具，對(duì)TME中空間定義的區(qū)域內(nèi)PD-L1蛋白表達(dá)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化、定量和客觀評(píng)估。在另一項(xiàng)研究中，DSP成功地識(shí)別了20種以上的生物標(biāo)志物，這些標(biāo)志物可以預(yù)測(cè)黑色素瘤患者對(duì)免疫治療的反應(yīng)。

在單細(xì)胞RNA測(cè)序過(guò)程中，由于組織通常被均質(zhì)化以獲得轉(zhuǎn)錄組的平均概況，造成空間信息丟失。最近，空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)（Spatial Transcriptomics）被開(kāi)發(fā)，該技術(shù)利用空間條形碼寡脫氧胸腺嘧啶微陣列實(shí)現(xiàn)完整組織切片中的轉(zhuǎn)錄組定量可視化和分析。

這項(xiàng)新技術(shù)首先在小鼠嗅球上得到證實(shí)，并遵循如下標(biāo)準(zhǔn)工作流程：組織切片、固定、蘇木精和伊紅（H&E）染色、亮視野成像、組織滲透、cDNA合成、組織切除、探針釋放、文庫(kù)制備、測(cè)序、數(shù)據(jù)處理、數(shù)據(jù)可視化和分析。

通過(guò)ST對(duì)乳腺癌、前列腺癌和皮膚惡性黑色素瘤活檢的數(shù)據(jù)分析顯示，腫瘤內(nèi)和腫瘤間的異質(zhì)性達(dá)到了前所未有的水平，以及通過(guò)RNA測(cè)序分析和/或標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)學(xué)注釋?zhuān)⑨屇[瘤區(qū)域和外周之間的基因表達(dá)譜存在明顯差異。此外，利用這種技術(shù)進(jìn)行的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了通過(guò)重新增殖小膠質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)IL-6信號(hào)，這在治療方面可能有價(jià)值。

為了利用ST的潛力，研究人員最近開(kāi)發(fā)了一種稱(chēng)為MIA的分析方法，其整合了單細(xì)胞RNA測(cè)序和ST技術(shù)產(chǎn)生的數(shù)據(jù)集，將細(xì)胞定位到組織上特定的區(qū)域。作為概念證明，MIA是在胰腺導(dǎo)管腺癌的數(shù)據(jù)集上進(jìn)行的，并且揭示了特定的細(xì)胞類(lèi)型和亞群在空間限制區(qū)域的富集，這些區(qū)域以前是未知或不可檢測(cè)的。

基于空間轉(zhuǎn)錄學(xué)的概念，10× Genomics發(fā)布了Visum空間基因表達(dá)解決方案，與ST技術(shù)的第一次迭代相比，它具有更高的分辨率和更高的靈敏度。其被用于深入研究與組織結(jié)構(gòu)和功能相關(guān)的疾病，除了用于癌癥免疫治療外，還可以用于神經(jīng)系統(tǒng)疾病。

盡管轉(zhuǎn)錄空間分析技術(shù)相對(duì)較新，但在腫瘤免疫治療中已被廣泛探索。FISH和RNAscope是診斷和預(yù)測(cè)實(shí)體瘤和血液瘤的有效臨床工具。較新的技術(shù)，如MERFISH和Visium，通過(guò)前所未有的分辨率和靈敏度實(shí)現(xiàn)批量轉(zhuǎn)錄組分析。這類(lèi)技術(shù)的可獲得性不斷增加，能夠發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物，用于預(yù)測(cè)免疫治療的反應(yīng)，并允許基于其獨(dú)特TME的異質(zhì)性的個(gè)性化治療方法。這些空間分析技術(shù)還可能與降維技術(shù)相結(jié)合，例如UMAP用于可視化TME的免疫景觀。

展望未來(lái)，DSP提供了mRNA表達(dá)的空間分析和數(shù)字表征，但仍然受到可同時(shí)研究的基因靶點(diǎn)數(shù)量的限制。盡管Visium在市場(chǎng)上相對(duì)較新，但其在短時(shí)間內(nèi)不斷改進(jìn)，在疾病病理學(xué)和臨床轉(zhuǎn)化研究方面有著巨大的潛力。

研究人員可利用各種不斷發(fā)展的空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)，重要的是既要考慮技術(shù)特征，包括空間分辨率、敏感性、特異性和組織類(lèi)型，又要考慮實(shí)際因素，如成本，與可用資源的兼容性和周轉(zhuǎn)時(shí)間。研究人員必須仔細(xì)考慮其研究問(wèn)題，并選擇一種與其研究和臨床目標(biāo)密切相關(guān)的適當(dāng)技術(shù)。

首發(fā)公號(hào)：國(guó)家基因庫(kù)大數(shù)據(jù)平臺(tái)

參考文獻(xiàn)

Nerurkar S N, Goh D, Cheung C C L, et al. Transcriptional Spatial Profiling of Cancer Tissues in the Era of Immunotherapy: The Potential and Promise[J]. Cancers, 2020, 12(9): 2572.

腫瘤免疫治療的現(xiàn)狀如何？

腫瘤的免疫治療和過(guò)去的治療方法，化療、靶向治療，這些基底是完全不同的，比如說(shuō)化療是直接通過(guò)細(xì)胞毒的作用，通過(guò)藥物來(lái)直接殺滅腫瘤細(xì)胞。但是腫瘤的免疫治療來(lái)講的話(huà)，它是通過(guò)機(jī)體的調(diào)節(jié)我們的免疫功能，從而達(dá)到一個(gè)抗腫瘤的作用。

它的原理是這樣的，因?yàn)槟[瘤細(xì)胞進(jìn)入到我們的機(jī)體之后，非常的狡猾，因?yàn)槲覀內(nèi)梭w里面有大量的免疫細(xì)胞、T細(xì)胞，如果識(shí)別到它是一個(gè)壞的細(xì)胞的話(huà)，會(huì)主動(dòng)的把這些細(xì)胞清除掉。但是腫瘤細(xì)胞它非常的狡猾，它知道T細(xì)胞上面，有一個(gè)叫做PD1的蛋白，所以腫瘤細(xì)胞，它也會(huì)生成一個(gè)叫PD - L1 的蛋白。

PD- L1可以和正常T細(xì)胞上的PD1相結(jié)合，結(jié)合了之后，機(jī)體T細(xì)胞，就不能識(shí)別出這種腫瘤細(xì)胞，也就是講警察不能認(rèn)出這些壞蛋，從而了就可以起到一個(gè)免疫逃逸的作用，所以這就是一個(gè)腫瘤細(xì)胞免疫逃逸的作用。

腫瘤免疫治療是怎么樣的呢？這一類(lèi)是一些免疫檢查點(diǎn)的抑制劑，這些藥物進(jìn)入到人體之后，可以把PD1蛋白和PD-L1蛋白的結(jié)合，把它分開(kāi)之后，我們機(jī)體的T細(xì)胞，也就是我們?nèi)梭w內(nèi)的警察，就能夠認(rèn)識(shí)到這些腫瘤細(xì)胞，不是我們的朋友，而是我們的敵人，是一些壞蛋。從而就通過(guò)我們的免疫系統(tǒng)，來(lái)把這些壞的腫瘤細(xì)胞殺滅，這就是腫瘤免疫治療的一個(gè)基底。

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