2016年10月9日 訊 / --近日,來(lái)自肯塔基大學(xué)醫(yī)學(xué)院的研究人員通過(guò)研究鑒別出了小核仁rna的一種新功能,即其能夠調(diào)節(jié)一種名為選擇性剪接的基礎(chǔ)細(xì)胞過(guò)程,這項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)或?qū)椭_(kāi)發(fā)治療肥胖和癌癥的新型療法。選擇性剪接能夠使得細(xì)胞通過(guò)單一基因制造多種蛋白質(zhì)。
在選擇性剪接過(guò)程中,一種名為前體信使rna(被拼接的分子)是dna模板間的中間產(chǎn)物,而dna模板中包含了多種能夠制造蛋白質(zhì)的指令,同時(shí)這種蛋白質(zhì)產(chǎn)物最終還能夠被這些指令所產(chǎn)生。在上述過(guò)程中,細(xì)胞中的剪接機(jī)器能夠切斷pre-mrna的片段,隨后其能夠?qū)⑹O碌钠芜M(jìn)行拼接產(chǎn)生一種成熟的mrna,而這種mrna就能夠用來(lái)翻譯產(chǎn)生蛋白質(zhì),許多pre-mrna都能以多種方式來(lái)進(jìn)行拼接,而且產(chǎn)生的不同的mrna都能夠用于產(chǎn)生獨(dú)特的突變體蛋白。
但大多數(shù)mrna并不能產(chǎn)生蛋白質(zhì),在這些所謂的非編碼rnas中都是一些小核仁rna,其能夠知道特定的rna修飾蛋白進(jìn)入到自己的“工作崗位”,讓研究者好奇的是,有些小核仁rna的缺失被認(rèn)為和某些疾病的發(fā)生有關(guān),比如特定的癌癥或普拉德-威利綜合征等,普拉德-威利綜合征是一種遺傳性的肥胖疾病,這些關(guān)聯(lián)都表明,小核仁rna所干的事情或許要比直接進(jìn)行rna修飾要多得多。
研究者發(fā)現(xiàn),某些小核仁rna能夠與一些新發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞伙伴來(lái)合作共同調(diào)節(jié)選擇性剪接過(guò)程,由于選擇性剪接能夠調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的功能,因此研究者推測(cè),小核仁rna的角色或許就能夠解釋為何特定小核仁rna的缺失會(huì)和疾病發(fā)生關(guān)聯(lián)。如果缺失小核仁rna是引發(fā)某些疾病的原因,那么研究者就假設(shè),如果能夠利用合成性的替代品來(lái)移除缺失的小核仁rna或許就能夠有效治療某些疾病。此前研究中,研究人員發(fā)現(xiàn)了一種名為snord115的小核仁rna,其并不會(huì)在普拉德-威利綜合征患者機(jī)體中產(chǎn)生,但其卻能夠調(diào)節(jié)血清素2c受體的pre-mrna進(jìn)行選擇性剪接,由于該受體參與了食欲的控制及飲食的攝入,因此研究者表示,選擇性剪接誘導(dǎo)的功能改變或許就能夠誘發(fā)普拉德-威利綜合征患者過(guò)度攝食,隨后研究者計(jì)劃深入研究來(lái)確定是否替代snord115就能夠成功治療患者的癥狀。
研究者stamm表示,為了阻斷患者過(guò)度飲食的行為,我們尋找了一種方法來(lái)替代小核仁rna,最終我們找到了一種寡核苷酸(斷鏈rna),其能夠模擬自然發(fā)生的小核仁rna的效應(yīng)。當(dāng)研究人員在動(dòng)物模型中檢測(cè)這種寡核苷酸時(shí),他們發(fā)現(xiàn),接受寡核苷酸的動(dòng)物攝食量相比對(duì)照組明顯減少了;這就表明,在選擇性剪接的水平下食物的消耗能夠被調(diào)節(jié),而且研究者還能夠利用rna寡核苷酸來(lái)干擾整個(gè)系統(tǒng)。
因此帕-魏二氏綜合征患者機(jī)體中缺失的小核仁rna或許就能夠幫助研究人員開(kāi)發(fā)新型療法來(lái)治療疾病,而且該研究還能夠幫助開(kāi)發(fā)多種治療罕見(jiàn)遺傳障礙的策略;普拉德-威利綜合征是一種遺傳性疾病,該病是正常肥胖的“擴(kuò)大”版,基于本文研究結(jié)果,研究者希望后期通過(guò)更為深入的研究來(lái)開(kāi)發(fā)出治療一般人群肥胖的新療法。
腫瘤內(nèi)異質(zhì)性對(duì)癌癥患者的準(zhǔn)確診斷和個(gè)性化治療策略的制定提出了重大挑戰(zhàn)。此外,這種異質(zhì)性可能是治療耐藥性、疾病進(jìn)展和癌癥復(fù)發(fā)的基礎(chǔ)。雖然免疫療法可以獲得很高的成功率,但選擇壓力加上腫瘤內(nèi)部的動(dòng)態(tài)進(jìn)化推動(dòng)耐藥克隆的出現(xiàn),使腫瘤在某些患者中持續(xù)存在。 為了提高免疫療法的療效,研究人員已經(jīng)使用空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)來(lái)識(shí)別并隨后阻斷腫瘤異質(zhì)性的來(lái)源。
原位雜交(ISH)是一種使細(xì)胞或組織中特定DNA或RNA分子可視化的分子技術(shù)。ISH是基于DNA/DNA或DNA/RNA雙鏈的互補(bǔ)性,將標(biāo)記的核酸探針原位雜交到目標(biāo)上。通過(guò)這種方式,我們可以獲得有用的空間信息。
FISH是檢測(cè)微生物、診斷實(shí)體瘤和血液瘤以及指導(dǎo)癌癥治療的有效臨床工具。例如,F(xiàn)ISH通常用于檢測(cè)慢性髓系白血病中的BCR-ABL1 t(9;22)易位和各種癌癥中的許多融合基因。FISH還被用于確認(rèn)乳腺癌中HER2基因的擴(kuò)增,從而確定最有可能受益于曲妥珠單抗(一種抗HER2的單克隆抗體)治療的患者。另一個(gè)重要的例子是在非小細(xì)胞肺癌中檢測(cè)EML4-ALK融合基因。隨著越來(lái)越多的免疫療法被開(kāi)發(fā)和批準(zhǔn),研究人員試圖用FISH來(lái)預(yù)測(cè)癌癥免疫治療的反應(yīng)性。 為了擴(kuò)大FISH的有效性,可以將FISH與IHC或IF結(jié)合起來(lái),同時(shí)檢測(cè)不同細(xì)胞類(lèi)型的RNA和蛋白質(zhì),以更好地表征腫瘤微環(huán)境(TME)。
為了解決傳統(tǒng)FISH的局限性,研究人員從研究DNA轉(zhuǎn)移到研究單分子RNA,并采用高通量的方法,由此產(chǎn)生了smFISH技術(shù),其能夠可視化和量化單個(gè)mRNA分子,并表征內(nèi)源性基因表達(dá)的空間模式。 通過(guò)靶向細(xì)胞mRNA而不是DNA分子,smFISH已經(jīng)成為評(píng)估腫瘤內(nèi)轉(zhuǎn)錄異質(zhì)性的有力工具。
RNAscope是一種商業(yè)化的基于ISH的技術(shù),可以檢測(cè)多達(dá)12個(gè)不同的RNA靶點(diǎn),并且可以方便地與IHC和/或IF結(jié)合,以自動(dòng)化的方式同時(shí)研究RNA和蛋白質(zhì)。相對(duì)于其他基于FISH的技術(shù),RNAscope已經(jīng)設(shè)計(jì)了13000個(gè)以上的RNA探針,并通過(guò)商業(yè)化的流程進(jìn)行驗(yàn)證。因此,它是一種用于基礎(chǔ)研究和臨床實(shí)驗(yàn)的省時(shí)和友好的方法。 RNAscope已經(jīng)廣泛應(yīng)用于各個(gè)學(xué)科,包括傳染病、癌癥、免疫治療、炎癥和神經(jīng)科學(xué)。 特別是,它是IHC的一種強(qiáng)有力的替代方法,可以評(píng)估各種實(shí)體瘤中免疫檢查點(diǎn)的表達(dá),如PD-L1。通過(guò)檢測(cè)特定RNA,RNAscope闡明了TME、免疫逃逸機(jī)制以及新的預(yù)測(cè)和預(yù)后癌癥生物標(biāo)志物。
在免疫療法的背景下,RNAscope在理解CAR-T細(xì)胞療法方面發(fā)揮了寶貴的作用。 RNAscope已被用于評(píng)估靶基因表達(dá)的特異性,并跟蹤C(jī)AR-T細(xì)胞在異種移植小鼠模型中的分布。擴(kuò)展到人類(lèi)樣本,已有研究驗(yàn)證了BCMA的表達(dá)是多發(fā)性骨髓瘤CAR-T細(xì)胞免疫治療的靶點(diǎn)。
盡管可以從RNAscope等技術(shù)中獲得更高的靈敏度和特異性,但最終需要基于FISH的技術(shù),允許進(jìn)行高通量轉(zhuǎn)錄組分析,以更好地表征顯示獨(dú)特基因表達(dá)譜的稀有細(xì)胞群和細(xì)胞類(lèi)型。 MERFISH和seqFISH,不僅提供了改進(jìn)的RNA定量、信號(hào)放大和檢測(cè),而且提供了基于圖像的轉(zhuǎn)錄組分析。
MERFISH從smFISH改良而來(lái),采用了基于條形碼的組合標(biāo)記方法,然后進(jìn)行多輪雜交,以確保熒光信號(hào)的高亮度和一次可檢測(cè)到的大量RNA。
seqFISH是另一種基于連續(xù)幾輪條形碼雜交標(biāo)記的Multiplexed smFISH技術(shù) 。 例如,seqFISH被用來(lái)對(duì)小鼠胚胎干細(xì)胞和腦組織中>10000種mRNA進(jìn)行成像,具有較高的準(zhǔn)確性和分辨率。相關(guān)研究已證明seqFISH是研究和獲得T細(xì)胞成熟過(guò)程中調(diào)控基因表達(dá)動(dòng)態(tài)的有力工具。另一項(xiàng)研究將微流體技術(shù)與Multiplexed smFISH技術(shù)結(jié)合起來(lái)研究乳腺癌中的腫瘤異質(zhì)性證明,Multiplexed smFISH可以從不同角度進(jìn)一步優(yōu)化。
盡管smFISH技術(shù)前景廣闊,但由于探針設(shè)計(jì)、驗(yàn)證、圖像分析和解碼的復(fù)雜性,基于smFISH的復(fù)合技術(shù)尚未廣泛應(yīng)用于轉(zhuǎn)化研究或臨床應(yīng)用。使用非多重FISH、定量PCR、IHC和IF在mRNA或蛋白質(zhì)水平上研究單個(gè)基因的表達(dá)通常更為方便,尤其是當(dāng)研究的基因數(shù)量較少時(shí),如一組預(yù)后標(biāo)志物。另一個(gè)限制是,由于序列雜交的性質(zhì),總成像時(shí)間加起來(lái)至少為18小時(shí),還不包括最初的36~48h的探針雜交時(shí)間,因此與其他技術(shù)相比(如DSP和Visium),總體通量較低。此外,Multiplexed?smFISH技術(shù)只能評(píng)估新鮮冷凍組織中一種類(lèi)型的分析物,如RNA。新興的技術(shù)如DSP,可以評(píng)估新鮮冷凍組織和病理學(xué)常規(guī)使用的標(biāo)準(zhǔn)福爾馬林固定石蠟包埋(FFPE)組織中的蛋白質(zhì)和RNA。
DSP是一種高復(fù)雜度的空間分析方法,其克服了Multiplexed smFISH技術(shù)的主要限制。DSP使用寡核苷酸檢測(cè)技術(shù)來(lái)量化FFPE組織樣本中的蛋白質(zhì)或RNA。
與順序雜交技術(shù)(如MERFISH)不同,DSP提供了更高效的工作流程,可在48小時(shí)內(nèi)從10~20個(gè)組織切片或多達(dá)384個(gè)目標(biāo)區(qū)域產(chǎn)生結(jié)果。此外,與只分析RNA的Multiplexed smFISH相比,DSP可以同時(shí)檢測(cè)96種蛋白質(zhì)或1400個(gè)mRNA。這一特征與癌癥免疫治療特別相關(guān),因?yàn)閙RNA和蛋白質(zhì)表達(dá)模式的差異可用于闡明轉(zhuǎn)錄后調(diào)控和翻譯后修飾,從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)不穩(wěn)定,影響預(yù)后和治療反應(yīng)。同時(shí),DSP還保存了組織樣本的完整性,可以儲(chǔ)存珍貴的樣本,并用于將來(lái)的進(jìn)一步分析。
DSP在免疫治療領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用,例如已有研究用DSP評(píng)價(jià)了接受化學(xué)免疫治療的彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤患者的免疫微環(huán)境;DSP在免疫檢查點(diǎn)阻斷治療方面也有研究,包括抗PD-L1和抗PD-1治療。DSP可以作為一種輔助診斷工具,對(duì)TME中空間定義的區(qū)域內(nèi)PD-L1蛋白表達(dá)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化、定量和客觀評(píng)估。在另一項(xiàng)研究中,DSP成功地識(shí)別了20種以上的生物標(biāo)志物,這些標(biāo)志物可以預(yù)測(cè)黑色素瘤患者對(duì)免疫治療的反應(yīng)。
在單細(xì)胞RNA測(cè)序過(guò)程中,由于組織通常被均質(zhì)化以獲得轉(zhuǎn)錄組的平均概況,造成空間信息丟失。最近,空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)(Spatial Transcriptomics)被開(kāi)發(fā),該技術(shù)利用空間條形碼寡脫氧胸腺嘧啶微陣列實(shí)現(xiàn)完整組織切片中的轉(zhuǎn)錄組定量可視化和分析。
這項(xiàng)新技術(shù)首先在小鼠嗅球上得到證實(shí),并遵循如下標(biāo)準(zhǔn)工作流程:組織切片、固定、蘇木精和伊紅(H&E)染色、亮視野成像、組織滲透、cDNA合成、組織切除、探針釋放、文庫(kù)制備、測(cè)序、數(shù)據(jù)處理、數(shù)據(jù)可視化和分析。
通過(guò)ST對(duì)乳腺癌、前列腺癌和皮膚惡性黑色素瘤活檢的數(shù)據(jù)分析顯示,腫瘤內(nèi)和腫瘤間的異質(zhì)性達(dá)到了前所未有的水平,以及通過(guò)RNA測(cè)序分析和/或標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)學(xué)注釋?zhuān)⑨屇[瘤區(qū)域和外周之間的基因表達(dá)譜存在明顯差異。此外,利用這種技術(shù)進(jìn)行的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了通過(guò)重新增殖小膠質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)IL-6信號(hào),這在治療方面可能有價(jià)值。
為了利用ST的潛力,研究人員最近開(kāi)發(fā)了一種稱為MIA的分析方法,其整合了單細(xì)胞RNA測(cè)序和ST技術(shù)產(chǎn)生的數(shù)據(jù)集,將細(xì)胞定位到組織上特定的區(qū)域。作為概念證明,MIA是在胰腺導(dǎo)管腺癌的數(shù)據(jù)集上進(jìn)行的,并且揭示了特定的細(xì)胞類(lèi)型和亞群在空間限制區(qū)域的富集,這些區(qū)域以前是未知或不可檢測(cè)的。
基于空間轉(zhuǎn)錄學(xué)的概念,10× Genomics發(fā)布了Visum空間基因表達(dá)解決方案,與ST技術(shù)的第一次迭代相比,它具有更高的分辨率和更高的靈敏度。其被用于深入研究與組織結(jié)構(gòu)和功能相關(guān)的疾病,除了用于癌癥免疫治療外,還可以用于神經(jīng)系統(tǒng)疾病。
盡管轉(zhuǎn)錄空間分析技術(shù)相對(duì)較新,但在腫瘤免疫治療中已被廣泛探索。FISH和RNAscope是診斷和預(yù)測(cè)實(shí)體瘤和血液瘤的有效臨床工具。較新的技術(shù),如MERFISH和Visium,通過(guò)前所未有的分辨率和靈敏度實(shí)現(xiàn)批量轉(zhuǎn)錄組分析。這類(lèi)技術(shù)的可獲得性不斷增加,能夠發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物,用于預(yù)測(cè)免疫治療的反應(yīng),并允許基于其獨(dú)特TME的異質(zhì)性的個(gè)性化治療方法。這些空間分析技術(shù)還可能與降維技術(shù)相結(jié)合,例如UMAP用于可視化TME的免疫景觀。
展望未來(lái),DSP提供了mRNA表達(dá)的空間分析和數(shù)字表征,但仍然受到可同時(shí)研究的基因靶點(diǎn)數(shù)量的限制。盡管Visium在市場(chǎng)上相對(duì)較新,但其在短時(shí)間內(nèi)不斷改進(jìn),在疾病病理學(xué)和臨床轉(zhuǎn)化研究方面有著巨大的潛力。
研究人員可利用各種不斷發(fā)展的空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù),重要的是既要考慮技術(shù)特征,包括空間分辨率、敏感性、特異性和組織類(lèi)型,又要考慮實(shí)際因素,如成本,與可用資源的兼容性和周轉(zhuǎn)時(shí)間。研究人員必須仔細(xì)考慮其研究問(wèn)題,并選擇一種與其研究和臨床目標(biāo)密切相關(guān)的適當(dāng)技術(shù)。
首發(fā)公號(hào):國(guó)家基因庫(kù)大數(shù)據(jù)平臺(tái)
參考文獻(xiàn)
Nerurkar S N, Goh D, Cheung C C L, et al. Transcriptional Spatial Profiling of Cancer Tissues in the Era of Immunotherapy: The Potential and Promise[J]. Cancers, 2020, 12(9): 2572.
《應(yīng)用生理學(xué)雜志》最新發(fā)表的一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn),姜黃素可能有助于改善慢性心力衰竭患者的運(yùn)動(dòng)不耐受性。基于此次研究結(jié)果和此前的研究證據(jù),研究人員指出,應(yīng)該制定更多的靶向藥物,同時(shí)鼓勵(lì)患者食用富含核因子e2相關(guān)因子2(Nrf2)激活劑的食品。因?yàn)楣趋兰≈蠳rf2的激活可能意味著一種新的治療方案,可以改善射血分?jǐn)?shù)降低的心力衰竭患者的生活質(zhì)量。
此前的研究表明Nrf2(一種調(diào)節(jié)抗氧化酶表達(dá)的蛋白質(zhì))水平的降低可能會(huì)導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)能力下降,而姜黃素可以促進(jìn)Nrf2蛋白分子的激活,基于此,研究人員試圖探討姜黃素對(duì)降低射血分?jǐn)?shù)的心力衰竭的小鼠的影響。
1
Nrf2:人體抗氧化激活器
轉(zhuǎn)錄因子Nrf2(nuclearfactorerythroid-2-relatedfactor2),是細(xì)胞防御氧化應(yīng)激反應(yīng)的重要轉(zhuǎn)錄因子,幾乎在人體所有細(xì)胞都存在。當(dāng)細(xì)胞受到氧化應(yīng)激或外源性毒性物質(zhì)等攻擊時(shí),Nrf2會(huì)迅速激活超過(guò)500個(gè)具有細(xì)胞保護(hù)功能的基因,能通過(guò)抗氧化、解毒、抑制炎癥反應(yīng)、促進(jìn)線粒體生物合成、增強(qiáng)細(xì)胞自噬等作用來(lái)保護(hù)細(xì)胞。
NRF2被稱為氧化還原平衡的主要調(diào)控因子——它是人們可以調(diào)整來(lái)破壞癌細(xì)胞中氧化與還原之間精妙平衡的一個(gè)開(kāi)關(guān)。這種轉(zhuǎn)錄因子在腫瘤化學(xué)預(yù)防和腫瘤耐藥性兩方面都起著重要作用,一些癌細(xì)胞能利用這種應(yīng)答保護(hù)其自身免受異常代謝活動(dòng)和失控生長(zhǎng)所帶來(lái)的破壞性氧化副產(chǎn)物。因此Nrf2傳統(tǒng)上被認(rèn)為是腫瘤的調(diào)控因子,是開(kāi)發(fā)抗癌藥物的重要指標(biāo)[1]。
氧化應(yīng)激
氧化應(yīng)激是由自由基在體內(nèi)產(chǎn)生的一種負(fù)面作用,并被認(rèn)為是導(dǎo)致衰老和疾病的一個(gè)重要因素。人體幾乎所有的器官都很容易受到氧化應(yīng)激帶來(lái)的傷害,癥狀表現(xiàn)不計(jì)其數(shù),如疲倦、全身無(wú)力、肌肉和關(guān)節(jié)痛、消化不良、焦慮、抑郁、皮膚瘙癢、頭痛,以及注意力難以集中和感染難以痊愈等。由氧化應(yīng)激水平升高誘發(fā)的最常見(jiàn)疾病有心臟病、癌癥、骨關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、糖尿病以及神經(jīng)退化性問(wèn)題如阿爾茲海默癥、帕金森病[2]。
2
Nrf2:腫瘤的調(diào)控因子
癌癥的形成是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程,研究表明癌癥的形成與氧化應(yīng)激密切相關(guān)[3],而Keap1/Nrf2/ARE是氧化應(yīng)激的重要信號(hào)通路。氧化應(yīng)激Keap1/Nrf2/ARE 通路可以調(diào)節(jié)許多抗氧化劑的轉(zhuǎn)錄,維持細(xì)胞體內(nèi)平衡,解毒致癌和毒素物質(zhì)避免機(jī)體造成損害。炎癥也常常被認(rèn)為是導(dǎo)致癌癥的重要因素[4],而炎癥的發(fā)生往往伴隨著氧化應(yīng)激。
癌癥與Nrf2密切相關(guān)?
Nrf2控制的二相解毒抗氧化系統(tǒng)激活是各種癌癥化學(xué)預(yù)防方法中最有效的手段。因此Nrf2是最重要的癌癥預(yù)防目標(biāo)調(diào)節(jié)通路。
各種內(nèi)外源性致癌物的體內(nèi)生物轉(zhuǎn)化依靠肝臟的Ⅰ相和Ⅱ相代謝酶來(lái)完成。來(lái)自藥物異生物質(zhì)、致癌物和環(huán)境毒素可通過(guò)經(jīng)Ⅰ相代謝酶(如細(xì)胞色素P450)催化后形成活性致癌物,與DNA及蛋白質(zhì)結(jié)合形成加成物,引起癌基因和抑癌基因改變;而經(jīng)Ⅱ相代謝酶,如谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GlutathioneS-transferase,GST)的生物轉(zhuǎn)化作用,使終致癌物親水性增強(qiáng),促進(jìn)其體外排泄。而這一過(guò)程由主要受Keap1/Nrf2/ARE(Nrf2與DNA的抗氧化劑反應(yīng)元件ARE結(jié)合)通路調(diào)控[5]。
在過(guò)去大量的研究中發(fā)現(xiàn),Nrf2/ARE(Nrf2與DNA的抗氧化劑反應(yīng)因子ARE結(jié)合)信號(hào)通路與癌癥息息相關(guān),例如肝癌[6]、乳腺癌[7-8]、口腔癌[9]、肺癌[10]、結(jié)腸癌[11-12]、皮膚癌[13]等等。
研究表明,許多膳食抗癌成分都表現(xiàn)出抗氧化及二相解毒抗氧化系統(tǒng)誘導(dǎo)效應(yīng)。這些天然化合物能通過(guò)Nrf2/ARE途徑,誘導(dǎo)Ⅱ相代謝酶而發(fā)揮化學(xué)防癌作用。Keap1/Nrf2/ARE通路調(diào)節(jié)許多抗氧化劑的反應(yīng)作用,激活一系列防御系統(tǒng),通過(guò)抑制致癌物的活化或誘導(dǎo)Ⅱ相代謝酶的解毒作用阻斷或逆轉(zhuǎn)癌癥發(fā)生。
Nrf2的“兩面性”
但對(duì)于癌癥患者的治療來(lái)說(shuō)(尤其在中晚期癌癥患者中),激活調(diào)控Nrf2有時(shí)卻可能是有害的。在臨床上,癌細(xì)胞在晚期階段,腫瘤細(xì)胞經(jīng)常會(huì)表現(xiàn)出多種遺傳物質(zhì)的改變以及高度氧化應(yīng)激的狀態(tài)。此時(shí)Nrf2就突出它的兩面性,在癌細(xì)胞中對(duì)Nrf2具有較高的活性,當(dāng)Nrf2在細(xì)胞中過(guò)表達(dá)時(shí),會(huì)導(dǎo)致癌細(xì)胞對(duì)化療藥物的抗性增加,而相應(yīng)下調(diào)Nrf2使得化療藥物對(duì)癌細(xì)胞更敏感[14]。
預(yù)防癌癥的天然Nrf2/ARE激活劑
盡管Nrf2的在癌癥的預(yù)防治療過(guò)程中的“兩面性”實(shí)在令人頭疼,但Keap1/Nrf2/ARE信號(hào)通路在癌癥的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。尋找中藥或天然藥物中有效的Nrf2抑制劑,利用中藥或天然藥物中的有效成分阻斷正常細(xì)胞癌變的發(fā)生,控制并降低惡性腫瘤的發(fā)生率,或作為作為化療藥物的佐劑,使化療藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞敏感,阻止癌細(xì)胞的擴(kuò)散對(duì)于現(xiàn)代癌癥預(yù)防的具有重要意義。
飲食和草藥中的植物活性物在預(yù)防癌癥中的作用逐漸受到重視。這些物質(zhì)在癌癥預(yù)防和輔助化療中的作用可以從細(xì)胞學(xué)研究中獲得證據(jù)。研究表明,食物來(lái)源的營(yíng)養(yǎng)成分中如辣椒素、薯蕷皂苷元、丁香油酚、甘草酸、熊果酸、茶多酚、蘿卜硫素和姜黃素等均是有助于防癌癥的佳品[15]。
而比較確切能激活Nrf2系統(tǒng)的物質(zhì)包括姜黃素、蘿卜硫素和綠茶提取物等。攝取這些物質(zhì)能通過(guò)提高內(nèi)源性抗氧化系統(tǒng)和減少炎癥反應(yīng),提高機(jī)體降低各種來(lái)自食物藥物和環(huán)境來(lái)源的致癌物和因素導(dǎo)致的致癌效應(yīng)。大量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究證明這些手段具有潛在的預(yù)防效應(yīng)。
蘿卜硫素
蘿卜硫素存在于西蘭花中,是常用的化學(xué)保護(hù)劑,也是常用的Nrf2激活劑,通常被認(rèn)為是通過(guò)Nrf2介導(dǎo)的II相解毒酶防止氧化損傷和除去致癌物質(zhì),在不同程度上對(duì)抗癌癥發(fā)展起到重要的作用,輔助多種癌癥治療。
茶多酚
茶多酚是茶葉中的主要活性成分,在抗癌和治療心血管疾病方面起作用。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示,茶多酚能顯著抑制致癌物二甲基苯并蒽(DMBA)(日常燒烤食物中所產(chǎn)生的致癌物)誘導(dǎo)的金黃地鼠頰囊黏膜癌變,同時(shí)伴隨Ⅰ相代謝酶活性的顯著降低以及Ⅱ相代謝酶和抗氧化酶活性的顯著升高[16]。
姜黃素
姜黃素已作為一種有效的Nrf2激活劑和癌癥化學(xué)預(yù)防劑,與其他幾種植物相似,被稱為抗氧化劑通過(guò)清除自由基和/或激活內(nèi)源性來(lái)拮抗致癌物觸發(fā)的氧化應(yīng)激來(lái)抗炎和預(yù)防癌癥。
姜黃素表現(xiàn)出抗氧化和抗炎癥效應(yīng),這些效應(yīng)是通過(guò)Nrf2相關(guān)的二相解毒酶和抗氧化酶產(chǎn)生。姜黃素不僅能通過(guò)阻斷IkB降解抑制NFkB發(fā)揮抗炎效應(yīng),通過(guò)抑制Akt和ERK磷酸化促進(jìn)抗氧化反應(yīng),也可通過(guò)抑制TNFk和Bcl-2表達(dá)影響細(xì)胞死亡。
在研究姜黃素抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖機(jī)制結(jié)果表明:姜黃素通過(guò)Nrf2依賴性下調(diào)Fen1基因,并降低Fen1啟動(dòng)子活性,從而通過(guò)Nrf2介導(dǎo)的Fen1表達(dá)下調(diào),抑制乳腺癌細(xì)胞增殖[17]。姜黃素誘導(dǎo)腫瘤生長(zhǎng)抑制Nrf2信號(hào)通路的激活已被證明是天然姜黃素防止癌癥發(fā)展的有效手段。
另外利用姜黃素的特性,通過(guò)引入其他物質(zhì)(如:二甲基基團(tuán))合成一種新的化合物,激活了JNK和PI3K信號(hào)通路,Nrf2依賴性保護(hù)正常細(xì)胞,從而用以預(yù)防癌癥[18]。
3
結(jié)語(yǔ)
目前癌癥已成為威脅人類(lèi)生命最嚴(yán)重的疾病之一。隨著工業(yè)的發(fā)展,造成環(huán)境污染的化學(xué)品種類(lèi)和數(shù)量不斷增加,由化學(xué)致癌物所致的癌癥發(fā)病率呈增高趨勢(shì),對(duì)癌癥的化學(xué)預(yù)防也成為癌癥研究的重要領(lǐng)域之一。不斷有研究資料顯示,許多天然化合物可作用于Nrf2/ARE通路,通過(guò)誘導(dǎo)Ⅱ相代謝酶的表達(dá),促進(jìn)內(nèi)外源性致癌物質(zhì)的生物轉(zhuǎn)化,從而在阻斷或抑制癌癥發(fā)展的過(guò)程中發(fā)揮重要作用。
中藥作為我國(guó)的天然寶庫(kù),在癌癥預(yù)防中具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),Keap1/Nrf2/ARE信號(hào)通路在癌癥的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮著重要作用,然而臨床上并沒(méi)有有效的Nrf2抑制劑,通過(guò)中藥對(duì)Keap1/Nrf2/ARE的研究,尋找中藥中有效的Nrf2抑制劑在癌癥預(yù)防中具有重要意義。
參考文獻(xiàn):
[1]Teimouri M,Junaid M,Saleem S,et al. In-vitro analysis of?selective nutraceuticals binding to human transcription factors?through computer aided molecular docking predictions[J].Bioinformation,2016,12(7):354-358
[2]百度百科詞條:氧化應(yīng)激
[3]Weinberg F,Chandel NS. Reactive oxygen species-dependent?signaling regulates cancer[J].Cell Mol Life Sci,2009,66(23):3663-73.
[4]Anand P ,Kunnumakkara AB,Sundaram C,et al. Cancer is a?preventable disease that requires major lifestyle changes.PharmRes,2008,25(9):2097-116.
[5]Surh Y J.Cancer chemoprevention with dietary?phytochemicals[J] .Nature Rev Cancer ,?2003 ,?3(10):768-780.
[6]Mahmoud AM,Zaki AR,Hassan ME,et al. Commiphora?molmol resin attenuates diethylnitrosamine/phenobarbital?induced hepatocarcinogenesis by modulating oxidative stress,inflammation,angiogenesis and?Nrf2/ARE/HO-1 signaling[J].Chem Biol Interact,2017,270:41-50.
[7]Yang Y,Guo R,Tian X,et?al. Synergistic?anti-tumor activity of?Nimotuzumab in combination with Trastuzumab in HER2-positive?breast cancer[J].Biochem Biophys Res?Commun,2017.
[8]Rajakumar T,Pugalendhi P,Thilagavathi S,et al. Allyl?isothiocyanate,a potent chemopreventive agent targets AhR/Nrf2 signaling pathway in chemically induced mammary?carcinogenesis[J].Mol Cell Biochem,2017.
[9]Huang CF,Zhang L,Ma SR,et al. Clinical significance of Keap1?and Nrf2 in oral squamous cell carcinoma[J].PLoS One,2013,8(12):e83479.
[10]Choi EJ,Jung BJ,Lee SH,et al. A clinical drug library screen?identifies clobetasol propionate as?an NRF2 inhibitor with?potential therapeutic efficacy in KEAP1 mutant lung cancer[J].Oncogene,2017.
[11]Chang LC,F(xiàn)an CW,Tseng WK,et al. The Ratio of Hmox1/Nrf2 mRNA Level in the Tumor Tissue Is a Predictor of Distant?Metastasis in Colorectal Cancer[J].Dis Markers,2016:8143465.
[12]Gonzalez-Donquiles C,Alonso-Molero J,F(xiàn)ernandez-Villa T.The?NRF2 transcription factor plays a dual role in colorectal cancer:A systematic review[J].PLoS One,2017,12(5):e0177549.
[13]Shan Y,Wei Z,Tao L,et al. Prophylaxis of Diallyl Disulfide on Skin Carcinogenic Model via p21-dependent Nrf2 stabilization[J].Sci Rep,2016,6:35676.
[14]Wang XJ,Sun Z,Villeneuve NF,et al. Nrf2 enhances resistance?of cancer cells to chemotherapeutic drugs,the dark side of?Nrf2[J].Carcinogenesis,2008,29(6):1235-43.
[15]Teimouri M,Junaid M,Saleem S,et?al. In-vitro analysis of?selective nutraceuticals binding to human transcription factors?through computer aided molecular docking predictions[J].Bioinformation,2016,12(7):354-358.
[16]Chandra-Mohan K V P,?Hara Y,?Abraham S K,?et al .Comparative evaluation of the chemopreventive efficacy of green?and black tea polyphenols in the hamster buccal pouch carcinogenesis model[J] .ClinBiochem,2005,38(10):879-886.
[17]Chen B,Zhang Y,Wang Y,et al. Curcumin inhibits proliferation?of breast cancer cells through Nrf2-mediated down-regulation of?Fen1 expression[J].J Steroid Biochem Mol Biol,2014,143:11-8.
[18]Tu ZS,Wang Q,Sun DD,et al. Design,synthesis,and?evaluation of curcumin derivatives as Nrf2 activators and?cytoprotectors against oxidative death[J].Eur J Med Chem,2017,134:72-85.
本文地址:http://www.soujuw.cn/jiankang/261981.html.
聲明: 我們致力于保護(hù)作者版權(quán),注重分享,被刊用文章因無(wú)法核實(shí)真實(shí)出處,未能及時(shí)與作者取得聯(lián)系,或有版權(quán)異議的,請(qǐng)聯(lián)系管理員,我們會(huì)立即處理,本站部分文字與圖片資源來(lái)自于網(wǎng)絡(luò),轉(zhuǎn)載是出于傳遞更多信息之目的,若有來(lái)源標(biāo)注錯(cuò)誤或侵犯了您的合法權(quán)益,請(qǐng)立即通知我們(管理員郵箱:602607956@qq.com),情況屬實(shí),我們會(huì)第一時(shí)間予以刪除,并同時(shí)向您表示歉意,謝謝!
下一篇: 畸胎瘤做完后肚子變大