另一種“瘦肉精”卷土重來！或讓病菌病毒產(chǎn)生耐藥性

到現(xiàn)在，我們都忘不了被“瘦肉精”支配的恐懼。但2017年央視3&15晚會又曝光了一種新型“瘦肉精”。記者調(diào)查發(fā)現(xiàn)，一些飼料企業(yè)瞞天過海地在往飼料中非法添加各種“禁藥”，包括“人用西藥”，而且這種現(xiàn)象并非個例。

江蘇遠(yuǎn)方中匯生物科技有限公司生產(chǎn)的“造肉一號”、山東省成武旺泰飼料有限公司生產(chǎn)的“速肥肽”、鄭州百瑞動物藥業(yè)公司的主打產(chǎn)品“厚祺崢重”、河南漯河宇信科技有限公司的主打產(chǎn)品“日長三斤”均在列…飼料違規(guī)添加禁用西藥，能使飼養(yǎng)的動物傻吃酣睡猛長。喹乙醇長期使用，會蓄積在動物體內(nèi)，誘變細(xì)胞染色體畸形，此外還會造成耐藥性，給人類身體健康帶來潛在危害。

造肉一號，是一種混合型飼料添加劑，能促進(jìn)生長、降低料肉比、改善體型、提高采食量，成分為半胱胺鹽酸鹽。但造肉一號的生產(chǎn)廠家——江蘇遠(yuǎn)方中匯生物科技有限公司總經(jīng)理李曉峰承認(rèn)，造肉一號中起關(guān)鍵作用的成分，他們是不會標(biāo)注出來的。公司的主打產(chǎn)品“味霸”，也偷偷加入了人用藥，能使豬傻吃酣睡猛長。

但是抗生素在肉里邊有殘留飼料違規(guī)添加禁用西藥后，抗生素在動物體內(nèi)有殘留，人吃了帶抗生素的肉后或產(chǎn)生“耐藥性”。長遠(yuǎn)來說，它可能會讓某種病菌、病毒產(chǎn)生耐藥性!

網(wǎng)友們紛紛留言，抑制不住內(nèi)心的憤怒：現(xiàn)在的人不要良心，啥錢都賺！這些沒有良心的商家他們早晚有一天會被雷劈！有些特殊群體比如孕婦能不吃肉和蛋嗎？良心何在？……

2017年，中央一號文件明確提出，要全面提升農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量和食品安全水平，深入開展農(nóng)獸藥殘留超標(biāo)特別是養(yǎng)殖業(yè)濫用抗生素治理，嚴(yán)厲打擊違禁超限量使用農(nóng)獸藥、非法添加和超范圍超限量使用食品添加劑等行為。

納米金在食品真菌毒素中的應(yīng)用

納米金
金的微小顆粒
納米金即指金的微小顆粒，其直徑在1～100nm，具有高電子密度、介電特性和催化作用，能與多種生物大分子結(jié)合，且不影響其生物活性。由氯金酸通過還原法可以方便地制備各種不同粒徑的納米金，其顏色依直徑大小而呈紅色至紫色。
中文名
納米金
外文名
AuNPs
直徑
1～100nm，
類別
金的微小顆粒
作用
高電子密度、介電特性和催化
發(fā)展歷史檢測技術(shù)發(fā)展檢測應(yīng)用優(yōu)點(diǎn)制備方法TA說
發(fā)展歷史
自從16世紀(jì)歐洲現(xiàn)代化學(xué)的奠基人、杰出的醫(yī)師、化學(xué)家Paracelsus制備出“飲用金”用來治療精神類疾病以來，納米金就開始登上了科學(xué)的舞臺。1857年英國科學(xué)家法拉第在研究道爾頓的理論時，利用氯化金還原出含納米金的溶液，發(fā)現(xiàn)在其中加入少量電解質(zhì)后，可使溶液由紅寶石色變?yōu)樗{(lán)色，并最終凝集為無色，而加入明膠等大分子物質(zhì)便可阻止這種變化。盡管當(dāng)時并不知道原因，但他的發(fā)現(xiàn)為納米金的應(yīng)用奠定了科學(xué)基礎(chǔ)。1885年納米金溶液在美國常作為治療酗酒的主要成分；1890年Koch醫(yī)生發(fā)現(xiàn)結(jié)核桿菌不能夠在金的表面存活；1890年納米金被用來治療關(guān)節(jié)炎；1935年芝加哥外科專家Edward等人發(fā)現(xiàn)納米金溶液能有效的減輕患者病痛，強(qiáng)健體質(zhì)。1939年Kausche和Ruska用電子顯微鏡觀察金顆粒標(biāo)記的煙草花葉病毒，呈高電子密度細(xì)顆粒狀。1971年Faulk和Taylor首次采用免疫金染色(immunogold staining，IGS)將兔抗沙門氏菌抗血清與納米金顆粒結(jié)合，用直接免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)檢測沙門氏菌的表面抗原，開創(chuàng)了納米金免疫標(biāo)記技術(shù)。
檢測技術(shù)發(fā)展
作為現(xiàn)代四大標(biāo)記技術(shù)之一的納米金標(biāo)記技術(shù)(nanogold labelling techique)，實(shí)質(zhì)上是蛋白質(zhì)等高分子被吸附到納米金顆粒表面的包被過程。吸附機(jī)理可能是納米金顆粒表面負(fù)電荷，與蛋白質(zhì)的正電荷基團(tuán)因靜電吸附而形成牢固結(jié)合，而且吸附后不會使生物分子變性，由于金顆粒具有高電子密度的特性，在金標(biāo)蛋白結(jié)合處，在顯微鏡下可見黑褐色顆粒，當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的配體處大量聚集時，肉眼可見紅色或粉紅色斑點(diǎn)，因而用于定性或半定量的快速免疫檢測方法中。由于球形的納米金粒子對蛋白質(zhì)有很強(qiáng)的吸附功能，可以與葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白等非共價結(jié)合，因而在基礎(chǔ)研究和實(shí)驗(yàn)中成為非常有用的工具。
納米金溶膠
作為顯微鏡示蹤物
1978年，Geobegan等將納米金標(biāo)記抗體用于普通光鏡下檢測B淋巴細(xì)腦表面膜免疫球蛋白，建立了光鏡水平的免疫金染色(immunogold staining，IGS)。1981年 Danscher用銀顯影方法增強(qiáng)金顆粒的可見度，并提高了靈敏度。Holgate等人于1983年建立了用銀顯影液光鏡下金顆粒的可見性的免疫金銀染色法(immunogold-siliver staining，IGSS)，利用銀的增強(qiáng)作用，加大單獨(dú)金粒子在光鏡下可視粒子的半徑，增加了小顆粒金粒子的標(biāo)記密度，提高了靈敏度。1986年Fritz等人又在IGSS法基礎(chǔ)上成功地進(jìn)行了彩色I(xiàn)GSS法，使得結(jié)果更加鮮艷奪目。盡管如此，由于亞硝酸銀化合物是光敏性的，需要在暗室里進(jìn)行標(biāo)記，實(shí)驗(yàn)操作非常的不便，改用非光敏的醋酸銀化合物，價格又過于昂貴，所以納米金在光鏡中的應(yīng)用日漸減少。而利用納米金的高電子密度，能在電鏡下清晰的分辨顆粒，作為在透射電鏡(TEM)、掃描電鏡(sEM)和熒光顯微鏡的示蹤物在電鏡免疫化學(xué)和組織化學(xué)中得到了廣泛應(yīng)用。
應(yīng)用于均相溶膠顆粒免疫測定技術(shù)
均相溶膠顆粒免疫測定法(sol particle immunoassay， SPIA)是利用免疫學(xué)反應(yīng)時金顆粒凝聚導(dǎo)致顏色減退的原理，將納米金與抗體結(jié)合，建立微量凝集試驗(yàn)檢測相應(yīng)的抗原，如間接血凝一樣，用肉眼可直接觀察到凝集顆粒。已成功地應(yīng)用于PCG的檢測，直接應(yīng)用分光光度計(jì)進(jìn)行定量分析。
應(yīng)用于流式細(xì)胞儀
應(yīng)用熒光素標(biāo)記的抗體，通過流式細(xì)胞儀(Flow CytoMeter，F(xiàn)CM)計(jì)數(shù)分析細(xì)胞表面抗原，是免疫學(xué)研究中的重要技術(shù)之一。但由于不同熒光素的光譜相互重疊，區(qū)分不同的標(biāo)記很困難。Boehmer等研究發(fā)現(xiàn)，納米金可以明顯改變紅色激光的散射角，利用納米金標(biāo)記的羊抗鼠Ig抗體應(yīng)用于流式細(xì)胞術(shù)，分析不同類型細(xì)胞的表面抗原，結(jié)果納米金標(biāo)記的細(xì)胞在波長632nm時，90度散射角可放大10倍以上，同時不影響細(xì)胞活性。而且與熒光素共同標(biāo)記，彼此互不干擾。因此，納米金可作為多參數(shù)細(xì)胞分析和分選的有效標(biāo)記物，分析各類細(xì)胞表面標(biāo)志和細(xì)胞內(nèi)含物。
應(yīng)用于斑點(diǎn)免疫金銀染色技術(shù)
斑點(diǎn)免疫金銀染色法(Dot-IGS，IGSS)是將斑點(diǎn)ELISA與免疫納米金結(jié)合起來的一種方法。將蛋白質(zhì)抗原直接點(diǎn)樣在硝酸纖維膜上，與特異性抗體反應(yīng)后，再滴加納米金標(biāo)記的第二抗體，結(jié)果在抗原抗體反應(yīng)處發(fā)生金顆粒聚集，形成肉眼可見的紅色斑點(diǎn)，此稱為斑點(diǎn)免疫金染色法(Dot-IGS)。此反應(yīng)可通過銀顯影液增強(qiáng)，即斑點(diǎn)金銀染色法(Dot-IGS/IGSS)。
應(yīng)用于免疫印跡技術(shù)
免疫印跡技術(shù)(immunoblotting，IBT)也稱為免疫轉(zhuǎn)印技術(shù)，其原理是根據(jù)各種抗原分子量大小不同，在電泳中行走的速度不同，因而在硝酸纖維素膜上占據(jù)的位置也不同；把含有特異性抗體的血清和這一薄膜反應(yīng)，那么特異性的抗原抗體反應(yīng)就顯色。而納米金免疫印跡技術(shù)相比酶標(biāo)記免疫印跡技術(shù)具有簡單、快速、具有相當(dāng)高的靈敏度。而且應(yīng)用納米金將硝酸纖維素膜上未反應(yīng)抗體進(jìn)行染色，評估轉(zhuǎn)膜效率，校正抗原一抗體反應(yīng)的光密度曲線，即可進(jìn)行定量免疫印跡測定。
應(yīng)用于斑點(diǎn)金免疫滲濾測定技術(shù)
斑點(diǎn)金免疫滲濾測定法(dot immuno-gold filtration assay，DIGFA)是斑點(diǎn)免疫測定法(dot immunoboding assay，DIBA)中的一種，是1982年由Hawkes等人在免疫印跡技術(shù)基礎(chǔ)上改良發(fā)展起來的一項(xiàng)免疫學(xué)新技術(shù)。其原理完全同斑點(diǎn)免疫金染色法，只是在硝酸纖維膜下墊有吸水性強(qiáng)的墊料，即為滲濾裝置。在加抗原(抗體)后，迅速加抗體(抗原)，再加金標(biāo)記第二抗體，由于有滲濾裝置，反應(yīng)很快，在數(shù)分鐘內(nèi)即可顯出顏色反應(yīng)。與斑點(diǎn)免疫滲濾測定法(d o t immunotietration assay，DIFA)相比，所不同的是免加底物液，直接由紅色膠體金探針顯色，結(jié)果鮮艷，背景更清楚，可以在室溫下保存。該方法已成功地應(yīng)用于人的免疫缺陷病病毒(HI)的檢查和人血清中甲胎蛋白的檢測。使用的有HCG試劑盒，AFP試劑盒，消化道腫瘤篩檢試劑盒。
應(yīng)用于免疫層析技術(shù)
免疫層析法(gold immunochromatography assay， GICA)是將各種反應(yīng)試劑以條帶狀固定在同一試紙條上，待檢標(biāo)本加在試紙條的一端，將一種試劑溶解后，通過毛細(xì)作用在層析條上滲濾、移行并與膜上另一種試劑接觸，樣品中的待測物同層析材料上針對待測物的受體(如抗原或抗體)發(fā)生特異性免疫反應(yīng)。層析過程中免疫復(fù)合物被截留、聚集在層析材料的一定區(qū)域(檢測帶)，通過可目測的納米金標(biāo)記物得到直觀的顯色結(jié)果。而游離標(biāo)記物則越過檢測帶，達(dá)到與結(jié)合標(biāo)記物自動分離之目的。GICA特點(diǎn)是單一試劑，一步操作，全部試劑可在室溫長期保存。這種新的方法將納米金免疫檢測試驗(yàn)推進(jìn)到～個嶄新的階段。
生物傳感器
生物傳感器(biosensor)是指能感應(yīng)(或響應(yīng))生物、化學(xué)量，并按一定規(guī)律將其轉(zhuǎn)換成可用信號(包括電信號、光信號等)輸出的器件或裝置。在生物傳感器方面，納米金主要設(shè)計(jì)為免疫傳感器，是利用生物體內(nèi)抗原與抗體專一性結(jié)合而導(dǎo)致電化學(xué)變化設(shè)計(jì)而成。另外由于納米金的氧化還原電位是+1.68V，具有極強(qiáng)的奪電子能力，能大大提高作為測定血糖的生物傳感器葡萄糖氧化酶膜的活性，金顆粒越細(xì)，活性越大。
生物芯片
生物芯片是以膜、玻璃、硅等固相介質(zhì)為載體，其最大的優(yōu)點(diǎn)在于高通量、并行化、微型化。一次實(shí)驗(yàn)可同時檢測多種或多份生物樣品。生物芯片包括基因芯片、蛋白質(zhì)芯片、細(xì)胞芯片、組織芯片。生物芯片用于食品安全檢測領(lǐng)域的應(yīng)用主要包括農(nóng)藥、獸藥殘留檢測，食品微生物檢測、動物疫病監(jiān)測、轉(zhuǎn)基因動物植物檢測等。2002年P(guān)ark等在《Science》雜志上介紹了一種以納米金為探針的基于電荷檢測的新型基因芯片，該芯片具有非常好的靈敏度及特異性，可以在十萬分之一比率中檢測出單堿基突變的基因片段。
檢測應(yīng)用
食品檢測分析一般采用化學(xué)分析法(CA)、薄層層析法(TLC)、氣相色譜法(GC)、高效液相色譜法(HPLC)，但需要繁瑣、耗時的前處理，樣品損失也較大。相對于靈敏度較低的CA和TLC方法，GC、HPLC的靈敏度較高，但操作技術(shù)要求高、儀器昂貴，并不適合現(xiàn)場快速測定和普及，而以納米金為免疫標(biāo)記物的檢測技術(shù)正彌補(bǔ)了這些技術(shù)的缺點(diǎn)，在現(xiàn)代食品分析檢測中的運(yùn)用也越來越多。
獸藥殘留
所謂獸藥殘留是指動物產(chǎn)品的任何可食部分所含獸藥的母體化合物及，或其代謝物，以及與獸藥有關(guān)的雜質(zhì)的殘留。獸藥殘留既包括原藥也包括藥物在動物體內(nèi)的代謝產(chǎn)物。主要的殘留獸藥有抗生素類、磺胺藥類、呋喃藥類、抗球蟲藥、激素藥類和驅(qū)蟲藥類。獸藥通常是通過在預(yù)防和治療動物疾病用藥、在飼料添加劑中使用以及在食品保鮮中引入藥物而帶來對食品的污染。人長期攝入含獸藥的動物性食品后，不但會對人體產(chǎn)生毒性作用，出現(xiàn)過敏反應(yīng)，而且動物體內(nèi)的耐藥菌株可傳播給人體，當(dāng)人體發(fā)生疾病時，就給臨床上感染性疾病的治療帶來一定的困難，延誤正常的治療。另外有些殘留物還具有致畸、致癌、致突變作用。
Verheijen利用膠體金標(biāo)記純化的抗鏈霉素單克隆抗體，對鏈霉素的檢測限為160ng/ml，檢測方便快速，不需要其他試劑和儀器，時間僅需lOmintl41。而使用膠體金免疫層析試紙條，在檢測蝦肉等組織試樣中殘留氯霉素(chloramphenicol，CAP)殘留時，靈敏度可達(dá)到 lng/ml，只需5～10min，并且與類似物沒有交叉反應(yīng)。Yong Jin等也使用金標(biāo)法來檢測動物血漿和牛奶中的新霉素殘留，其檢測限為10ng/mltl6J。鹽酸克倫特羅即β2受體興奮劑，俗稱“瘦肉精”能增強(qiáng)脂解和減慢蛋白質(zhì)分解代謝，若在畜牧生產(chǎn)中使用，可明顯提高飼料轉(zhuǎn)化率和瘦肉率；但使用劑量過大，則會對動物和人(間接)的肝臟、腎臟等器官產(chǎn)生嚴(yán)重的毒副作用。盡管歐盟于1996年禁止在畜牧生產(chǎn)中使用該藥(EC Direc． tive 96/22/EC)，我國農(nóng)業(yè)部也于1997年明令禁止，但國內(nèi)“瘦肉精”中毒事件時有發(fā)生。劉見使用金標(biāo)試紙法快速檢測檢測鹽酸克倫特羅，最小檢測量達(dá)到40ng/ml。商品化的試紙條產(chǎn)品也比較成熟，比利時UCB Bio-products公司開發(fā)的Tlhe Beta STAR檢測法就是將特定的β-內(nèi)酰胺受體固定在試紙條上，用膠體金有色微粒作為標(biāo)記物，5min內(nèi)可以檢測到青霉素和頭孢霉素殘留。而國內(nèi)的劉平在用生物電化學(xué)傳感器檢測牛奶中殘留的青霉素時，認(rèn)為使用納米金將有助于提高傳感器的檢測限。
動物傳染病
動物傳染病不但會影響動物養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)，也對人類健康構(gòu)成威脅，聯(lián)合國糧農(nóng)組織和世界衛(wèi)生組織已把預(yù)防和控制嚴(yán)重的動物流行病作為其工作重點(diǎn)之一。蝦白斑病毒(white spot syndrome virus，WSSV)是阻礙蝦養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的主要因素，至今還沒有有效的藥物，所以及早檢測出病毒，顯得尤其重要。Wang Xiaojie等已成功研究了斑點(diǎn)免疫金滲濾法(DIGFA)t19~和金標(biāo)試紙法來檢測蝦白斑病毒，其中金標(biāo)試紙法的檢測限為1 μg/ml，而使用銀增強(qiáng)，可以達(dá)到0.01μg/ml。賴清金等使用金標(biāo)試紙條來檢測豬瘟病毒，10～15min就能檢出結(jié)果，并可根據(jù)檢測結(jié)果合理指導(dǎo)豬瘟免疫和建立適宜的免疫程序。禽流感病毒(AIV)是引起禽類急性死亡的烈性、病毒性傳染病，而且能感染人，我國許多地區(qū)也先后報道有高致病性禽流感的發(fā)生，給養(yǎng)禽業(yè)造成了重大的經(jīng)濟(jì)損失，也嚴(yán)重威脅了人類的健康。劉永德等將兔抗禽流感H5、H9亞型病毒抗體純化后，分別與制備的膠體金研制成免疫金探針，用改良的滲濾法安全快速地檢測被檢材料中禽流感H5、H9亞型病毒，3min即可得到結(jié)果，檢測靈敏度分別為1.62ug/ml和1.25μg/ml。
農(nóng)藥殘留
農(nóng)藥殘留分析的困難包括：樣品基質(zhì)背景復(fù)雜、前處理過程繁瑣，需要耗費(fèi)較多的時間、被測成分濃度較低、分析儀器的定性能力受到限制、儀器檢測靈敏度不夠等一系列問題，但使用金標(biāo)記的快速檢測可以很好的解決以上問題。國內(nèi)的王朔分別使用納米金免疫層析和納米金滲濾法檢測西維因的殘留，整個檢測過程只需5min，檢測限也分別達(dá)到100ug/L和50μg/L。國內(nèi)的生物技術(shù)公司也開發(fā)出了成熟的商品化產(chǎn)品，如克百威農(nóng)殘速測試紙條等。
致病微生物檢測
基于金標(biāo)記的快速檢測研究在致病微生物方面比較多，檢測的種類也比較多。最早Hasan以免疫磁性分離技術(shù)為基礎(chǔ)的免疫膠體金技術(shù)已成功應(yīng)用于01群霍亂弧菌(Vibriocholerae)的檢測。國內(nèi)洪幫興等人研究了以硝酸纖維膜為載體納米金顯色的寡核苷酸芯片技術(shù)，為在分子水平快速簡便的鑒別致病菌提供了可能，甚至可以檢出致病菌的耐藥性變異。該芯片技術(shù)對大腸埃希氏菌、沙門氏菌、志賀氏菌、霍亂弧菌、副溶血弧菌、變形桿菌、單核細(xì)胞增生李斯特菌、蠟樣芽孢桿菌、肉毒梭菌和空腸彎曲菌等10種(屬)具有高靈敏度和特異性，檢出水平可達(dá)10CFU/mlt251。殷涌光等在使用集成化手持式Spreeta TM SPR傳感器快速檢測大腸桿菌時，引入膠體金復(fù)合抗體作為二次抗體大幅度增加質(zhì)量，進(jìn)一步擴(kuò)大了檢測信號，同時延長膠體金復(fù)合抗體與微生物的結(jié)合過程，使檢測信號進(jìn)一步穩(wěn)定與放大，從而顯著提高了檢測精度，使該傳感器對大腸桿菌的檢測精度由10.6 CFU/ml提高到10.1CFU/ml。金免疫滲濾法重要的食源性致病菌之一大腸埃希氏菌0157：H7，檢測通常先以山梨醇麥康凱瓊脂(sMAC)進(jìn)行初篩，然后用生化和血清學(xué)試驗(yàn)做鑒定，一般需要24～48h，而采用膠體金免疫滲濾法檢測卻非常的簡便，在很短時間即可得到結(jié)果。
在致病菌快速檢測中金標(biāo)試紙條的研究越來越廣泛。謝昭聰?shù)葢?yīng)用膠體金免疫層析法檢測水產(chǎn)品中霍亂弧菌的研究中，增菌液霍亂弧菌含量為1CFU/ml，通過增菌12h后，即可應(yīng)用膠體金免疫層析法診斷試劑檢出，而一般水產(chǎn)品霍亂弧菌檢測所采用的傳統(tǒng)常規(guī)方法，檢測時限長，增菌培養(yǎng)需8～16h，分離培養(yǎng)需14～20h，初步報告需30h以上，實(shí)際操作中，需要3d以上才能出報告。腸桿菌科的大屬沙門氏菌可引起人的沙門氏菌性食物中毒，王中民等人采用免疫滲濾法可檢出85%的引起食物中毒的沙門氏菌，靈敏度為2.4×107CFU/ml，對最常見的鼠傷寒、豬霍亂和腸炎沙門氏菌，檢出率達(dá)100%，而采用膠體金免疫層析法的靈敏度為2.1×106CFU/mlt30j。被美國列為七種主要食源性致死病菌之一的李斯特菌，如果按照傳統(tǒng)的分離培養(yǎng)和鑒定技術(shù)需要l～2周時間，而采用免疫膠體金層析法只需10min就能得到檢測結(jié)果，靈敏度達(dá)到87.5%。
真菌毒素的檢測
真菌毒素(Mycotoxin)是由真菌(Fungi)產(chǎn)生的具有毒性的二級代謝產(chǎn)物，廣泛存在食品和飼料中，人類若誤食受污染的食品，就會中毒或誘發(fā)一定疾病，甚至癌癥。檢測食品中的真菌毒素常用理化方法或生物學(xué)方法。但理化法需要較昂貴的儀器設(shè)備，操作復(fù)雜。而運(yùn)用免疫技術(shù)檢測真菌毒素敏感性高，特異性強(qiáng)，非常適用于食物樣品的檢測。D．J．Chiao等使用金標(biāo)免疫層析法在10min之內(nèi)即可檢測50ng/ml的肉毒桿菌毒素B(BoNT/B)，如果使用銀增強(qiáng)則其檢測限可以達(dá)到50pg/ml，而且對A、E型肉毒桿菌毒素沒有交叉反應(yīng)。貉曲霉毒素是曲霉屬和青霉屬產(chǎn)生的一類真菌毒素，其中毒性最大、與人類健康關(guān)系最密切、對農(nóng)作物的污染最重、分布最廣的是赭曲霉素A(OTA)，賴衛(wèi)華等研制的赭曲霉毒素A快速檢測膠體金試紙條，檢測限達(dá)到了10ng/mlt331，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于我國對赭曲霉毒素的限量要求5μg/L。黃曲霉毒素B z的快速檢測國內(nèi)也有很多研究，孫秀蘭研制的黃曲霉毒素B，金標(biāo)免疫試紙條，其最低檢測限達(dá)到2．5ng/ml，而且能定性或半定量檢測食品中的黃曲霉毒素B，含量。
優(yōu)點(diǎn)
隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，食品分析檢測技術(shù)也在不斷地更新、完善和迅速發(fā)展，尤其是快速檢測技術(shù)更能適應(yīng)現(xiàn)代高效、快速的節(jié)奏和滿足社會的要求。儀器分析法可以保證數(shù)據(jù)的精確性和準(zhǔn)確性，但其流程仍比較煩瑣。盡管以納米金為標(biāo)記物的免疫分析法及其它速測技術(shù)的開發(fā)過程需投入較多資金和較長時間，但具有簡單、快速、靈敏度高、特異性強(qiáng)、價廉、樣品所需量少等優(yōu)點(diǎn)，其靈敏度與常規(guī)的儀器分析一致，適合現(xiàn)場篩選，而且其中的金免疫層析技術(shù)正在向定量、半定量檢測和多元檢測的方向發(fā)展，更加體現(xiàn)出金標(biāo)技術(shù)的優(yōu)勢?？傊?，快速檢測技術(shù)的快速、靈敏、簡便等優(yōu)點(diǎn)，使之在食品衛(wèi)生檢疫和環(huán)境檢測中有著廣泛的應(yīng)用價值和發(fā)展前景。
制備方法
配制濃度為2.44×10-3 mol/L 的HAuCl4·4H2O溶液、濃度為3.43×10-2 mol/L 的Na3C6H5O7·2H2O 溶液、濃度為1.00×10-4 mol/L 的 PVP 溶液, 以及濃度為0.391 mol/L 的NaBH4 溶液備用。在燒杯中加入10 mL 氯金酸溶液, 10 mL 或不加保護(hù)劑溶液, 80 mL 三蒸水, 將燒杯置于數(shù)顯測速恒溫磁力攪拌器上, 邊加熱邊攪拌, 攪拌的轉(zhuǎn)速設(shè)置為600 r/min, 加熱至75℃, 恒溫2 min, 用移液管移取一定體積的還原劑(Na3C6H5O7 或NaBH4)溶液,迅速一次加入到上述混合液, 開始計(jì)時, 使液體顏色恒定并持續(xù)加熱一段時間共9 min, 停止加熱, 繼續(xù)攪拌5 min 后, 停止攪拌, 冷卻至室溫, 所得液體為納米金溶膠。

獸藥殘留的危害有哪些

摘要：近年來，獸藥殘留引起食物中毒已逐漸成為人們普遍關(guān)注的一個社會熱點(diǎn)問題。在動物源食品中較容易引起獸藥殘留量超標(biāo)的獸藥主要有抗生素類、磺胺類、呋喃類、抗寄生蟲類和激素類藥物。獸藥殘留不僅可以直接對人體產(chǎn)生急、慢性毒性作用，引起細(xì)菌耐藥性的增加，而且還可以通過環(huán)境和食物鏈的作用，間接對人體健康造成潛在的危害。獸藥殘留產(chǎn)生原因
1、非法使用
我國農(nóng)業(yè)部在2003年(265)號公告中明文規(guī)定，不得使用不符合《獸藥標(biāo)簽和說明書管理辦法》規(guī)定的獸藥產(chǎn)品，不得使用《食品動物禁用的獸藥及其他化合物清單》所列21類藥物及未經(jīng)農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)的獸藥，不得使用進(jìn)口國明令禁用的獸藥，畜禽產(chǎn)品中不得檢出禁用藥物。但事實(shí)上，養(yǎng)殖戶為了追求最大的經(jīng)濟(jì)效益，將禁用藥物當(dāng)作添加劑使用的現(xiàn)象相當(dāng)普遍，如飼料中添加鹽酸克侖特羅（瘦肉精）引起的豬肉中毒事件等。
2、不遵守規(guī)定
休藥期的長短與藥物在動物體內(nèi)的消除率和殘留量有關(guān)，而且與動物種類，用藥劑量和給藥途徑有關(guān)。國家對有些獸藥特別是藥物飼料添加劑都規(guī)定了休藥期，但是大部分養(yǎng)殖場（戶）使用含藥物添加劑的飼料時很少按規(guī)定施行休藥期。
3、濫用藥物
在養(yǎng)殖過程中，普遍存在長期使用藥物添加劑，隨意使用新或高效抗生素，大量使用醫(yī)用藥物等現(xiàn)象。此外，還大量存在不符合用藥劑量、給藥途徑、用藥部位和用藥動物種類等用藥規(guī)定以及重復(fù)使用幾種商品名不同但成分相同藥物的現(xiàn)象。所有這些因素都能造成藥物在體內(nèi)過量積累，導(dǎo)致獸藥殘留。
4、違背有關(guān)規(guī)定
《獸藥管理?xiàng)l例》明確規(guī)定，標(biāo)簽必須寫明獸藥的主要成分及其含量等?？墒怯行┇F藥企業(yè)為了逃避報批，在產(chǎn)品中添加一些化學(xué)物質(zhì)，但不在標(biāo)簽中進(jìn)行說明，從而造成用戶盲目用藥。這些違規(guī)做法均可造成獸藥殘留超標(biāo)。
5、屠宰前用藥
屠宰前使用獸藥用來掩飾有病畜禽臨床癥狀，以逃避宰前檢驗(yàn)，這也能造成肉食畜產(chǎn)品中的獸藥殘留。此外，在休藥期結(jié)束前屠宰動物同樣能造成獸藥殘留量超標(biāo)。
獸藥殘留的危害有哪些
1、對人體的直接毒性作
（1）急、慢性毒性
獸藥殘留由于濃度低，加上人們食用數(shù)量有限，大多數(shù)藥物并不能由于殘留引起急性毒性，但也有少數(shù)人，由于吃了含有藥物殘留的動物性食品而發(fā)生急性中毒，前面所提到的廣東、浙江等地吃了含鹽酸克侖特羅的豬內(nèi)臟而發(fā)生的急性中毒事例。許多獸藥都有一定的毒性，據(jù)報道，如現(xiàn)已淘汰的氯霉素，就可引起再生障礙性貧血，磺胺二甲嘧啶能誘發(fā)人的甲狀腺癌，硝基咪唑及硝基呋喃類藥物，能引起人體細(xì)胞染色體突變和致畸胎作用，如果長期吃含有這些藥物的動物性食品，就有可能產(chǎn)生慢性毒性作用，由于目前研究不夠，診斷還跟不上去，故很少見到這方面的報道。
（2）特殊毒性
許多獸藥都具有致畸、致突變及致癌作用（稱“三致”作用），如苯丙咪唑類抗蠕蟲藥，通過抑制細(xì)胞活性，可殺滅蠕蟲及蟲卵，抗蠕蟲作用廣泛。然而，這種抑制細(xì)胞活性的作用，使其具有潛在的致突變性和致畸性。又如雌激素、硝基呋喃類及喹惡啉類，都已證明具有致癌作用。我記得中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所曾用喹乙醇作致突變試驗(yàn)的陽性對照物。
在人們?nèi)粘５氖澄镏?，是不允許含有任何量的已知致癌物的，對曾用致癌物進(jìn)行治療或飼喂過的食品動物，屠宰時其食用部分是不允許有致癌物的殘留。否則，人們長期食用含三致作用藥物殘留的動物性食品時，這些殘留物便會對人體產(chǎn)生有害作用，或在人體中蓄積，最終產(chǎn)生致癌、致畸、致突變作用。近年來，人群中腫瘤發(fā)生率不斷升高，人們一直在懷疑這與環(huán)境污染及動物性食品中的藥物殘留有關(guān)。
（3）激素樣作用
激素類（包括雌激素與同化激素），除用于疾病防治和同步發(fā)情外，還曾用作畜、禽的促生長劑，后來發(fā)現(xiàn)有致癌作用，先后被禁止用作促生長劑。上世紀(jì)八十年代，美、加因使用激素作為肉牛促生長劑，牛肉出口到歐盟遭到了封殺，美、加等出口國為此上訴至WTO，此案歷時了10年，歐盟雖然敗訴，但仍迫使美、加在出口牛肉的生產(chǎn)中，不使用任何激素。目前，我國一些人非法將這類藥物用于畜禽、水產(chǎn)養(yǎng)殖，如果吃了含有這類藥物殘留的產(chǎn)品，有可能破壞人機(jī)體的激素平衡，干擾人的內(nèi)分泌功能，影響生育能力，甚至發(fā)生癌癥，這不得不引起人們的關(guān)注。
（4）過敏反應(yīng)
許多抗菌藥如：青霉素、四環(huán)素類、磺胺類及某些氨基糖甙類等藥物，均可引起人的過敏反應(yīng)，這些藥物無論是全身，還是局部（乳管）用藥，均可從乳汁排出，奶中的青霉素經(jīng)加熱都不能被完全破壞，喝了殘留這些藥物的奶，引起皮膚瘙癢和蕁麻疹屢見不鮮，嚴(yán)重時，可出現(xiàn)過敏性休克，甚至危及生命。當(dāng)這些抗菌藥物殘留進(jìn)入人體后，就使敏感人群致敏，產(chǎn)生抗體，當(dāng)這些被致敏的人，再接觸這些抗生素或用這些抗生素治療時，這些抗生素就會與抗體結(jié)合，生成抗原抗體復(fù)合物，發(fā)生過敏反應(yīng)。
2、對人類胃腸道微生物的影響
近年來，國內(nèi)、外許多研究者認(rèn)為，有抗菌藥物殘留的動物性食品，可以對人的胃腸道的正常菌群產(chǎn)生不良影響，部分敏感菌受抑制或被殺死，耐藥菌或條件性致病菌〔如大腸桿菌〕大量繁殖，致使胃腸道中微生物平衡遭到破壞，使機(jī)體易發(fā)感染性疾病，而且由于耐藥而難以治療。
3、對人類病原菌耐藥性的影響
近年來，獸藥抗菌藥物的廣泛使用，細(xì)菌的耐藥性不斷加強(qiáng)，而且很多細(xì)菌已由單一耐藥發(fā)展到多重耐藥。動物飼料中添加抗菌藥物比例很少，造成動物機(jī)體長期與低濃度藥物接觸，使得耐藥菌不斷增多，耐藥性也不斷增強(qiáng)?？咕幬餁埩粼趧游镄允称分?，同樣道理，也使人長期與低濃度藥物接觸，導(dǎo)致人體內(nèi)耐藥菌的增加。如今，不論是動物體內(nèi)，還是在人體內(nèi)，細(xì)菌的耐藥性已經(jīng)到了相當(dāng)嚴(yán)重的程度?，F(xiàn)已證實(shí)，細(xì)菌的耐藥基因可以在人群中細(xì)菌、動物群中細(xì)菌和生態(tài)系統(tǒng)中細(xì)菌間互相傳遞，由此可導(dǎo)致致病菌（沙門氏菌、大腸桿菌、腸球菌等）產(chǎn)生耐藥性，而引起人類和動物感染性疾病治療的失敗。所有國家都應(yīng)建立對食品動物中細(xì)菌耐藥性的監(jiān)測，對用作動物促生長與治療用抗生素和可引起交耐藥的抗生素，應(yīng)禁止使用，以免人類醫(yī)療資源的浪費(fèi)。

養(yǎng)殖場注意事項(xiàng)

養(yǎng)殖場注意事項(xiàng)

養(yǎng)殖場注意事項(xiàng)，在生活中有很多人會自己創(chuàng)業(yè)，而對于農(nóng)村的人來說，最好的創(chuàng)業(yè)方式就是通過養(yǎng)殖業(yè)，因?yàn)樵谵r(nóng)村有足夠大的場地，不同的動物養(yǎng)殖方法是不同的，下面一起來看看養(yǎng)殖場注意事項(xiàng)。

養(yǎng)殖場注意事項(xiàng)1 一、建筑安全

在建設(shè)畜禽養(yǎng)殖場、畜禽圈舍時要嚴(yán)格落實(shí)建筑安全生產(chǎn)制度，施工方要嚴(yán)格按照安全規(guī)范開展施工。對年久失修的畜禽養(yǎng)殖場戶要開展建筑安全整改，禁止在有安全隱患的建筑內(nèi)生產(chǎn)經(jīng)營。養(yǎng)殖場選址不存在水淹、坍塌、滑坡等安全隱患。建筑材料或室內(nèi)裝飾材料不得采用彩鋼板或聚氨酯材料。

二、防災(zāi)安全

在雨季，特別是暴雨、強(qiáng)降雨、大雪、大風(fēng)等天氣來臨前，養(yǎng)殖場戶要注意排查養(yǎng)殖場內(nèi)外環(huán)境，及時清理排水溝渠、磚墻修繕、加固屋頂、補(bǔ)漏等工作，防范山洪、泥石流、山體滑坡等自然災(zāi)害和發(fā)生水淹、塌頂?shù)惹闆r發(fā)生。高溫天氣要做好防暑工作，加強(qiáng)通風(fēng)降溫，防治人畜中暑。

三、用電安全

1、養(yǎng)殖戶應(yīng)加強(qiáng)防火措施，消防設(shè)施設(shè)備配備齊全。杜絕明火，嚴(yán)禁亂拉電線，用煤爐加溫時，與周邊可燃物保持一定距離。疏散通道、安全出口保持暢通；疏散指示標(biāo)志、應(yīng)急照明完好。另外，在養(yǎng)殖大棚附近可以挖水池、儲存水缸和沙土等，以備不時之需。

2、應(yīng)當(dāng)采用防雨、防潮、防水的燈具、開關(guān)、插座。使用電纜線或線路套管作為電源線，并按電工操作規(guī)程架設(shè)。用電線路杜絕老化、私拉亂接、超負(fù)荷使用。進(jìn)戶總線及分線路安裝漏電保護(hù)。

四、空間安全

畜禽養(yǎng)殖場的沼氣池、化糞池、深坑、密閉或半封閉存糞池等容易發(fā)生缺氧、中毒、爆炸等危及人畜生命安全事故的區(qū)域，養(yǎng)殖場戶要按照安全生產(chǎn)規(guī)范要求開展作業(yè)，并做好安全防護(hù)措施，禁止私自下池作業(yè)。對建有沼氣池、化糞池等糞污儲存處理池的養(yǎng)殖場要印發(fā)張貼安全生產(chǎn)規(guī)范，開展從業(yè)人員沼氣安全生產(chǎn)教育培訓(xùn)。

沼氣池建設(shè)要符合安全技術(shù)規(guī)范，出料口要安裝防護(hù)和警示標(biāo)識。露天沼液池、多級沉淀池、深坑等要設(shè)立警示標(biāo)志，并加裝護(hù)欄、圍欄等設(shè)施，避免人畜跌落溺水。在寒冷季節(jié)，要提醒養(yǎng)殖場戶嚴(yán)禁在密閉的環(huán)境內(nèi)采用燃燒木炭等方式進(jìn)行取暖供暖。

五、機(jī)械安全

養(yǎng)殖場戶對養(yǎng)殖場內(nèi)配備的飼料粉碎機(jī)、切割機(jī)、自動料塔、青貯打捆機(jī)、干濕分離機(jī)、翻耙機(jī)、智能化設(shè)備等機(jī)械要嚴(yán)格按照操作規(guī)范，落實(shí)專人操作維護(hù)，加強(qiáng)機(jī)械維修保養(yǎng)和安全生產(chǎn)技術(shù)指導(dǎo)，開展農(nóng)機(jī)駕駛操作培訓(xùn)，提高養(yǎng)殖場戶農(nóng)業(yè)機(jī)械操作安全意識。

六、質(zhì)量安全

畜禽養(yǎng)殖場戶要健全養(yǎng)殖檔案，實(shí)現(xiàn)養(yǎng)殖環(huán)節(jié)質(zhì)量安全過程監(jiān)控。畜禽養(yǎng)殖者要依法依規(guī)使用獸藥、飼料和飼料添加劑，嚴(yán)禁使用“瘦肉精”等違禁添加物和國家明令禁止的獸藥及其他化合物。要切實(shí)做好高致病性禽流感等人畜共患病和非洲豬瘟等重大動物疫病常態(tài)化防控工作，堅(jiān)決防止發(fā)生區(qū)域性重大動物疫情，堅(jiān)決維護(hù)動物衛(wèi)生安全。

嚴(yán)格按照國家規(guī)定，對病死畜禽進(jìn)行無害化處理，不得銷售、販賣、加工或隨意拋棄病死畜禽，確保畜禽產(chǎn)品質(zhì)量安全。對畜禽進(jìn)行采血、醫(yī)療、解剖或無害化處理過程中，操作人員必須做好安全防護(hù)措施。醫(yī)療器械、醫(yī)療廢棄物等應(yīng)按規(guī)定做好消毒和無害化處理，以免造成人畜共患病的傳染和其他傷害。

養(yǎng)殖場注意事項(xiàng)2畜禽養(yǎng)殖場應(yīng)該選擇地勢較高、平坦干燥、排水良好和背風(fēng)向陽的.地方。要注意通風(fēng)流暢、采光性強(qiáng)，交通、水電便利并遠(yuǎn)離污染源。平原地區(qū)，場址應(yīng)選址在比周圍地段稍高的地方；山區(qū)應(yīng)選在稍平的緩坡地建設(shè)畜禽養(yǎng)殖場。

應(yīng)保證水源水量充足，使用方便。畜禽飲水水質(zhì)應(yīng)符合農(nóng)業(yè)部制定的《無公害食品畜禽飲用水水質(zhì)》標(biāo)準(zhǔn)（NY 5027-2008 ）。畜禽養(yǎng)殖場投產(chǎn)后，每年應(yīng)監(jiān)測水源水質(zhì)2次，并定期清洗消毒供水系統(tǒng)。

一定要遠(yuǎn)離化工廠、工業(yè)公害污染區(qū)、礦區(qū)等。大、中型畜禽養(yǎng)殖場必須要遠(yuǎn)離村鎮(zhèn)、居民點(diǎn)，畜禽舍應(yīng)在居民區(qū)下風(fēng)向，距離城鎮(zhèn)居民區(qū)、文化教育科研等人口集中區(qū)域及公路等主要交通干線500米以上。場區(qū)空氣清潔、無污染，場區(qū)環(huán)境安靜，無噪音干擾或干擾較輕。

不應(yīng)在原有舊畜禽養(yǎng)殖場上新建養(yǎng)殖場或擴(kuò)建，不得位于畜禽類屠宰場、畜禽產(chǎn)品加工廠、獸醫(yī)站、畜禽產(chǎn)品交易市場等下風(fēng)向。

大、中型畜禽養(yǎng)殖場必備的畜禽養(yǎng)殖設(shè)備主要包括各種畜禽舍、畜欄、地板、墊料、籠具，喂料及飲水設(shè)備、通風(fēng)設(shè)備、光照設(shè)備、環(huán)境控制設(shè)備、清糞設(shè)備以及運(yùn)輸設(shè)備等。

畜禽舍建筑材料應(yīng)無毒、無害。畜禽舍墻壁、屋頂、天花板應(yīng)選用堅(jiān)固、防水、防風(fēng)、防蟲的材料，易于清洗消毒。畜禽舍地面也要排水好、衛(wèi)生、安全舒適，易于清洗消毒。

畜禽舍內(nèi)應(yīng)有一定數(shù)量和大小的窗戶，以保證畜禽舍正常通風(fēng)和采光，要安裝排氣扇和風(fēng)機(jī)，保證通風(fēng)換氣。

畜禽養(yǎng)殖場環(huán)保設(shè)施建設(shè)應(yīng)根據(jù)原國家環(huán)境保護(hù)總局和國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局聯(lián)合發(fā)布的《畜禽養(yǎng)殖業(yè)污染物排放標(biāo)準(zhǔn)》執(zhí)行，配套建設(shè)糞便污水處理設(shè)施以及畜禽尸體無害化設(shè)施。

養(yǎng)殖場注意事項(xiàng)3養(yǎng)殖場注意事項(xiàng)如下：

1、 養(yǎng)殖場大門、生產(chǎn)區(qū)和畜舍人口處皆要設(shè)置消毒池，內(nèi) 放火堿液，一般10 ~ 15天更換新配的消毒液。畜舍內(nèi)用具消毒 前，一定要先徹底清掃干凈糞尿。

2、 盡可能選用廣譜的消毒劑或根據(jù)特定的病原體選用對其 作用最強(qiáng)的消毒藥。消毒藥的稀釋度要準(zhǔn)確，應(yīng)保證消毒藥能有 效殺滅病原微生物，并要防止腐蝕、中毒等問題的發(fā)生。

3、 有條件或必要的情況下，應(yīng)對消毒質(zhì)量進(jìn)行監(jiān)測，檢測 各種消毒藥的使用方法和效果。并注意消毒藥之間的相互作用， 防止互作使藥效降低。

4、 不準(zhǔn)任意將兩種不同的消毒藥物混合使用或消毒同一種 物品，因?yàn)閮煞N消毒藥合用時常因物理或化學(xué)配伍禁忌而使藥物失效。

5、 消毒藥物應(yīng)定期替換，不要長時間使用同一種消毒藥物， 以免病原菌產(chǎn)生耐藥性，影響消毒效果。

上海抽檢的46項(xiàng)獸藥殘留是哪些?

產(chǎn)生獸藥殘留的主要獸藥
在動物源食品中較容易引起獸藥殘留量超標(biāo)的獸藥主要有抗生素類、磺胺類、呋喃類、抗寄生蟲類和激素類藥物。

1 、抗生素類
大量、頻繁地使用抗生素，可使動物機(jī)體中的耐藥致病菌很容易感染人類；而且抗生素藥物殘留可使人體中細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性，擾亂人體微生態(tài)而產(chǎn)生各種毒副作用。目前，在畜產(chǎn)品中容易造成殘留量超標(biāo)的抗生素主要有氯霉素、四環(huán)素、土霉素、金霉素等。

2、 磺胺類

磺胺類藥物主要通過輸液、口服、創(chuàng)傷外用等用藥方式或作為飼料添加劑而殘留在動物源食品中。在近15年～20年，動物源食品中磺胺類藥物殘留量超標(biāo)現(xiàn)象十分嚴(yán)重，多在豬、禽、牛等動物中發(fā)生。
3、 激素和β-興奮劑類
在養(yǎng)殖業(yè)中常見使用的激素和β-興奮劑類主要有性激素類、皮質(zhì)激素類和鹽酸克侖特羅等。目前，許多研究已經(jīng)表明鹽酸克侖特羅、已烯雌酚等激素類藥物在動物源食品中的殘留超標(biāo)可極大危害人類健康。其中，鹽酸克侖特羅（瘦肉精）很容易在動物源食品中造成殘留，健康人攝入鹽酸克侖特羅超過20 μg就有藥效，5倍～10倍的攝入量則會導(dǎo)致中毒。/news737.html
　4、其他獸藥
呋喃唑酮和硝呋烯腙常用于豬或雞的飼料中來預(yù)防疾病，它們在動物源食品中應(yīng)為零殘留，即不得檢出，是我國食品動物禁用獸藥。苯并咪唑類能在機(jī)體各組織器官中蓄積，并在投藥期，肉、蛋、奶中有較高殘留。
獸藥在防治動物疾病、提高生產(chǎn)效率、改善畜產(chǎn)品質(zhì)量等方面起著十分重要的作用。然而，由于養(yǎng)殖人員對科學(xué)知識的缺乏以及一味地追求經(jīng)濟(jì)利益，致使濫用獸藥現(xiàn)象在當(dāng)前畜牧業(yè)中普遍存在。濫用獸藥極易造成動物源食品中有害物質(zhì)的殘留，這不僅對人體健康造成直接危害，而且對畜牧業(yè)的發(fā)展和生態(tài)環(huán)境也造成極大危害。

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