目的 觀察表沒食子兒荼素沒食子酸酯(epigallocatechingallate,EGCG)對正常生理代謝狀態(tài)下人皮膚成纖維細胞(human skin fibroblast,HSF)自然老化以及經(jīng)長、中波紫外線(UVA及UVB)多次輻射后HSF光損傷的影響。方法 分離新生兒包皮獲得原代HSF,將其分為正常生理代謝傳代實驗組(A組)和多次UV照射實驗組(B組)。預(yù)實驗選定EGCG有效作用質(zhì)量濃度25mg·L^-1。A組細胞包括加入EGCG干預(yù)組和空白對照組,共孵育80d。B組HSF細胞分組包括:空白對照組、EGCG干預(yù)組、多次UVA組、多次UVA4-EGCG組、多次UVB組及多次UVB4-EGCG組,其中UVA和UVB均采用文獻提示日常生理劑量,每天照射,持續(xù)照射2周。采用組織化學(xué)染色法檢測細胞中衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶的表達量,觀察細胞自然老化及照光后的老化情況;采用流式細胞儀測定細胞周期及細胞凋亡率。結(jié)果 A組中,EGCG組的β-半乳糖苷酶陽性細胞數(shù)較正常對照組下降了47.60%(P〈0.05)。B組中正常細胞組及EGCG組均只見少量的β-半乳糖苷酶陽性細胞。其余幾組陽性細胞比率為:多次UVB組〈多次UVA組〈EGCG4-多次UVB組〈EGCG4-多次UVA組,4組細胞間陽性比率差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P〈0.05)。日常劑量UV多次輻射后可上調(diào)HSF的凋亡率,經(jīng)EGCG處理的兩組細胞凋亡率與單純UVB組和單純UVA組比較分別增加了87.08%和56.92%。結(jié)論 EGCG可減緩生理代謝狀態(tài)下的HSF老化;EGCG可進一步增加UV多次輻射后的細胞老化及細胞凋亡,此可能是EGCG減輕自然老化去除多次光損傷不同機制所致。
完成機構(gòu):[1]南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院皮膚科,南京210029 [2]江蘇省中醫(yī)院皮膚科,南京210029
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